一、自体神经组织匀浆修复面神经缺损的实验研究（论文文献综述）
戴依娜[1]（2021）在《四种冷冻保护剂玻璃化法保存人指固有神经的实验研究》文中研究指明目的:评估二甲基亚砜、甘油、丙二醇、乙二醇四种冷冻保护剂在玻璃化法保存人指固有神经中的保护效果,筛选合适的人指固有神经冷冻保护剂,为人指固有神经的玻璃化法保存提供一定的理论依据。方法:取2018年10月到2020年10月在遵义医科大学第五附属（珠海）医院行截肢手术后病人放弃肢体的人指固有神经共75个片段,每段1cm,将75个片段随机分为5组（4个实验组,1个对照组）,每组15个片段,分别为:30%二甲基亚砜组、30%甘油组、30%乙二醇组、30%丙二醇组和空白对照组。实验组分别添加对应种类的冷冻保护剂使用玻璃化法于液氮（-196℃）中保存3周,空白对照组添加等体积浓度的无菌生理盐水使用玻璃化法在液氮（-196℃）中保存3周。复温后进行石蜡包埋切片,运用HE染色法观察人指固有神经的组织结构变化;应用钙黄绿素-AM（Calcien-AM）和碘化丙啶（Propidium iodide,PI）双染色激光共聚焦显微镜（Laser scanning confocal microscope,LSCM）检测神经组织生物活性;ELISA法检测体外培养后的指固有神经片段的神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）表达情况,应用统计学对各组间NGF浓度水平进行比较,分析各组间差异有无统计学意义。结果:1、HE染色结果:HE染色后光镜下观察见,空白对照组神经鞘膜结构模糊,神经纤维排列疏松、紊乱,局部有脱髓鞘改变;乙二醇组神经鞘膜基本完整,神经纤维排列整齐、紧凑;二甲基亚砜组神经鞘膜相对完整,神经纤维间存在间隙,但结构排列整齐;甘油组神经鞘膜偶见断裂,神经纤维结构较松散;丙二醇组神经鞘膜结构存在,完整性欠佳,神经纤维结构松散。2、激光共聚焦显微镜结果:Calcein-AM和PI双染色,LSCM观察见:空白对照组神经纤维绿色荧光（代表活细胞）轻度较弱,红色荧光（代表死细胞）强度较强,且广泛分布。各实验组绿色荧光较空白对照组均增强,红色荧光强度均减弱;实验组中乙二醇组绿色荧光强度最强,分布广泛,红色荧光最弱,分布范围有限;二甲基亚砜组次之;甘油组及丙二醇组神经荧光强度及分布情况相似,绿色荧光强度最弱,红色荧光强度最强。3、人NGF表达ELISA检测结果:实验组与空白对照组相比较,空白对照组NGF水平最低,各实验组NGF水平均较空白对照组明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）。在实验组组间比较中,与乙二醇组比较,二甲基亚砜组、甘油组、丙二醇组NGF水平均较低,差异有统计学意义（P<0.05）;与二甲基亚砜组相比,乙二醇组NGF水平较高,差异有统计学意义（P<0.05）,甘油组及丙二醇组NGF水平较低,差异有统计学意义（P<0.05）;与甘油组相比,乙二醇组、二甲基亚砜组NGF水平较高,差异有统计学意义（P<0.05）,丙二醇组间比较无统计学差异（P>0.05）。与丙二醇组相比,乙二醇组、二甲基亚砜组NGF水平较高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1、乙二醇、二甲基亚砜、甘油、丙二醇对人指固有神经的玻璃化法保存有保护作用。2、30%体积浓度下,乙二醇对人指固有神经的玻璃化法保存的保护效果较二甲基亚砜、甘油、丙二醇好。3、30%体积浓度下,甘油与丙二醇对人指固有神经玻璃化保存的保护效果相似。
唐安群[2]（2020）在《定向诱导去分化脂肪（d-DFAT）细胞对大鼠面神经缺损的修复作用》文中研究表明面神经损伤是口腔颌面外科临床上一种常见且较为严重的创伤并发症之一,常伴随腮腺区域的外伤及手术相关创伤,进而导致面神经麻痹。继发于面神经损伤后引起的周围性面神经麻痹,是一种既影响患者面部运动功能（鼓腮无力,眼睑不能闭合等）又影响美观（口角歪斜,鼻唇沟消失等）的严重疾病,会给患者及家人带来了社交、审美等心理、精神障碍。近年来,随着组织工程和再生医学（Tissue engineering and regenerative medicine,TE/RM）飞速发展,针对长间断面神经缺损的问题研究出一系列组织工程神经移植物（Tissue engineered nerve grafts,TENGs）,其包含神经导管支架、支持细胞（种子细胞）、神经营养因子、细胞外基质以及细胞粘附分子等成分,通过模拟自体神经移植物的结构及生物学特点,建立理想的再生微环境以更好地促进再生神经轴突由近端向远端生长并再支配靶器官。临床上,脂肪组织可以通过反复使用安全、微创的吸脂术获得,因此其成为理想的种子细胞来源。成熟脂肪细胞是脂肪组织中最丰富的细胞类型,其占脂肪组织的90%以上。从脂肪组织中分离出的成熟脂肪细胞可以通过体外去分化（天花板培养）为成纤维细胞样细胞,称为去分化脂肪细胞（Dedifferentiated fat cells,DFAT cells）。与传统脂肪组织来源干细胞——脂源性干细胞（Adipose-derived stem cells,ASCs）相比,DFAT细胞体现出相同的增殖活性以及多向分化的能力。DFAT细胞与ASCs虽然同样来自于脂肪组织,但两者来源的细胞群体不同,DFAT细胞来源于成熟的脂肪细胞,而ASCs来源于脂肪组织中基质-血管部分（Stromal-vascular fraction,SVF）,而SVF是由一组异质性的细胞群组成的,内含内皮细胞、非特征性的基质细胞、血液细胞和组织型巨噬细胞等。通过两者来源我们可以推测DFAT细胞具有较高的同质性（Homogeneity）,纯度远高于ASCs,并且来源于占脂肪组织90%以上的成熟脂肪细胞的它来说,初期即可获得大量的细胞基数,为快速进行面神经缺损修复提供可能。目的:本研究拟通过体外细胞因子诱导,将DFAT细胞在体外定向诱导为类雪旺细胞样细胞,称为定向诱导分化的去分化脂肪细胞（Direction-induced dedifferentiated fat cells,d-DFAT cells）,并进一步探讨其对促进面神经再生的作用。利用d-DFAT细胞并复合I型胶原凝胶与硅胶导管构建一种新型组织工程神经并评价其修复面神经缺损的效果。方法:1.分离DFAT细胞（天花板培养法）及ASCs（差速离心法）原代细胞,并进行培养传代。然后通过流式细胞表面抗原的鉴定、三系诱导分化以及细胞形态这3种方式观察DFAT细胞是否与ASCs一样具有“干细胞特性”。2.将第2代DFAT细胞及ASCs应用细胞因子进行体外诱导分化,通过鉴定SCs的细胞表面标志物神经组织蛋白S-100β（Nerve tissue protein S-100β,S-100β）及胶质纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein,GFAP）来判断其是否具有向SCs分化的能力。3.将种子细胞（d-DFAT细胞、d-ASCs、DFAT细胞及ASCs）与Ⅰ型胶原蛋白混合后,与硅胶导管共培养形成TENGs。将其植入到SD大鼠面神经缺损模型中通过比较各组大鼠触须运动功能、再生面神经颊支神经电生理评估及再生面神经颊支形态学及组织学的情况,判断各组对SD大鼠面神经颊支缺损的再生能力。4.利用d-DFAT细胞构建3D细胞聚合体,并其进行组织学评估。结果:1.DFAT细胞与ASCs细胞形态成梭形的类成纤维细胞样;能够进行成骨及成脂诱导分化;流式细胞表面抗原鉴定显示CD44与CD90表达阳性而CD45表达阴性。2.DFAT细胞在神经诱导培养基作用下发生分化,形态上逐渐由梭形、扁平状多突起星状成纤维细胞样细胞,转变为纺锤形、细胞双极呈拉丝状延伸的SCs形态;免疫细胞化学（ICC）鉴定证实d-DFAT细胞与d-ASCs一样,均表达SCs表面标志物S-100β和GFAP。3.通过对SD大鼠触须运动的观察、神经电生理的检测以及组织学结构（髓鞘、轴突及胶质细胞）的评估,可知类雪旺样细胞组（d-DFAT细胞组与d-ASCs组）面神经功能及结构恢复的速度及程度均要优于干细胞组（DFAT细胞组与ASCs组）,但整体情况要略逊于自体神经组（Autograft组）。4.d-DFAT细胞培养形成3D d-DFAT细胞聚合体,并通过组织学评估我们可以发现,3D d-DFAT细胞聚合体由大量细胞组成,且细胞之间密度较高、排列较为均匀内含有大量的胶原纤维及I型胶原蛋白,细胞之间存在大量细胞外基质。结论:1.DFAT细胞与ASCs一样具有“干细胞特性”。2.DFAT细胞与ASCs一样能够向类雪旺细胞进行分化。3.建立了SD大鼠面神经颊支10mm缺损的模型;利用含种子细胞（d-DFAT细胞、d-ASCs、DFAT细胞及ASCs）的TENGs对大鼠面神经颊支缺损进行修复,通过大鼠触须运动、神经电生理及再生面神经颊支形态学及组织学的评价,发现d-DFAT细胞作为种子细胞与d-ASCs一样均能够很好的引导和支持轴突再生,并促进髓鞘的形成;与单纯的干细胞作为种子细胞（DFAT细胞、ASCs）进行比较,d-DFAT细胞在面神经颊支缺损修复的过程中具有显着的优势;但与自体神经移植相比下仍然有不足。4.成功构建3D d-DFAT细胞聚合体,通过对其进行组织学评估,发现其内细胞排列均匀且富含胶原纤维及I型胶原蛋白,细胞之间存在大量细胞外基质。
魏帅[3]（2019）在《股神经分支基膜管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究》文中认为目的:随着社会经济的快速发展,周围神经损伤的发病率也在逐年升高,给患者的生活质量和社会的和谐发展均带来了不利影响。除了可以减张缝合的小段神经缺损之外,自体神经移植仍然是治疗大段周围神经缺损的金标准,但其存在着许多问题,如来源受限、供区的二次损伤等。目前同种异体去细胞神经移植物对于桥接周围神经缺损展现出了其良好的临床应用前景。基膜管是去细胞神经的主要成分,但是不同种类去细胞神经移植物的基膜管是否存在差异,尚未见相关研究报道。本研究探索了大鼠股神经皮支与肌支基膜管的差异,同时观察其去细胞神经移植物在修复大鼠坐骨神经缺损中是否存在作用差异,为临床不同种类神经移植物的选择和3D打印组织工程神经提供一定的参考依据。方法:（1）取健康8周龄雄性SD大鼠的新鲜股神经的皮支与肌支,采用QAR-CAA-67抗体蛋白芯片技术检测股神经皮支和肌支结构蛋白表达情况,获取其差异表达蛋白;同时对其超微结构、组织学染色观察。（2）取SD大鼠股神经及其分支进行化学去细胞处理,对其超微结构、组织学和拉曼光谱特征进行评价。（3）通过动物体内实验,将股神经皮支去细胞神经移植物（Acellular femoral nerve cutaneous branch grafts,CBG）和肌支去细胞神经移植物（Acellular femoral nerve muscular branch grafts,MBG）分别填充于壳聚糖空导管中制作用以桥接大鼠坐骨神经缺损的（15mm）的组织工程去细胞神经移植物。实验动物随机分为4组（n=10）,分别植入CBG（CBG组）、MBG（MBG组）、壳聚糖空管（Hollow chitosan conduit,HCC组）以及自体神经（autologous nerve grafts,ANG组）修复缺损。术后通过步态分析、形态学以及组织学等检测方法评价其修复大鼠坐骨神经缺损的效果。结果:在髓鞘和基膜管（2837nm）厚度方面,股神经肌支均大于皮支;股神经肌支乙酰胆碱酯酶染色阳性部位所占比例较大,而皮支染色阴性部位所占比例较大;基因本体论富集分析显示在细胞成分（cellular component）方面细胞外空间（extracellular space）是高度富集的,更多的相关基因在股神经肌支中表达上调;术后12周,CBG组、MBG组以及ANG组的步态分析、腓肠肌肌肉湿重恢复率及病理学观察等检测的结果优于HCC组,CBG组和MBG组结果相似,组间无统计学差异,但两组结果均略差于ANG组,且具有统计学差异。结论:感觉神经（皮支）来源和运动神经（肌支）来源的神经移植物虽然在成分和基底膜结构上存在差异,但是其体内修复效果相似。3D打印神经移植物时必须考虑到其内部神经基膜管的厚度（2837nm）和三维空间取向性结构。
王宇强[4]（2019）在《透明质酸水凝胶缓释雪旺细胞外泌体修复坐骨神经长节段缺损的实验研究》文中认为目的:（1）体外分离新生SD大鼠雪旺细胞并培养,超速离心法提取雪旺细胞分泌的外泌体并进行特异性蛋白鉴定。透射电镜观察雪旺细胞外泌体的粒径和分布。（2）研究雪旺细胞外泌体对神经元及雪旺细胞的生物学作用。观察和研究透明质酸凝胶缓释外泌体的生物学特征参数。（3）探讨透明质酸水凝胶包裹缓释雪旺细胞外泌体填充PCL神经导管修复大鼠坐骨神经长节段缺损的形态学和功能学效果。方法:（1）采用0.1%Ⅳ型胶原酶消化法提取原代大鼠雪旺细胞,并采用DMEM/F12完全培养基培养和纯化。采用S100和Sox10进行纯度鉴定。采用CCK-8试剂盒对雪旺细胞的增殖状态进行检测。采用超高速离心法提取雪旺细胞分泌的外泌体,利用BCA试剂盒检测外泌体中蛋白的含量。Western blot法对雪旺细胞分泌外泌体表面标志物CD63、TSG101、CD9、Rab5和Na+/K+ATP酶进行鉴定。（2）构建1%浓度的透明质酸水凝胶,并将雪旺细胞外泌体进行包裹。体外放置于PBS中采用BCA试剂盒检测外泌体的缓释曲线。应用雪旺细胞外泌体干预雪旺细胞和神经元,CCK-8试剂盒检测外泌体对雪旺细胞的增殖作用,以及对两种细胞生物活性蛋白分泌的作用。ELISA法检测培养第1、3、5天后,外泌体干预的雪旺细胞表达神经生长因子（NGF）、脑源性神经生长因子（BDNF）、髓鞘零蛋白（P0）、细胞极性蛋白Par-3的水平。同时ELISA法检测外泌体干预后第1、3、5天时神经元中生长相关蛋白43（Growth-associatedprotein-43,GAP-43）、神经丝蛋白-200（Neurofilament-200,NF-200）、βIII–Tubulin的表达水平。（3）静电纺丝制备PCL神经导管,并采用扫描电镜观察导管的大体形态及显微结构,测量纤维丝的直径。采用小量程的力学仪器检测PCL神经导管的的杨氏模量、最大应力、最大载荷、最大断裂张力等力学参数。采用透明质酸水凝胶包裹雪旺细胞外泌体填充PCL神经导管,制备15mm长节段大鼠坐骨神经缺损,并进行端端吻合。采用单纯透明质酸填充PCL导管作为对照组,自体神经移植组也进行对照。在术后4、8、12周时检测大鼠坐骨神经指数、再生神经电生理功能。荧光金逆行示踪检测大鼠神经元胞体的存活情况及神经再生的情况。透射电镜观察三组再生神经的有髓轴突的直径、有髓轴突的数量、再生轴突的面积。NF-200和S100对各组再生神经的免疫荧光染色,观察期神经结构再生情况。HE染色观察三组大鼠腓肠肌肌纤维直径的差异。结果:（1）雪旺细胞在光镜下可以看到呈梭型,体积不大,存在双极,细胞核在中间,比较明显,有折光性。细胞多呈纵行排列的形态。雪旺细胞在接种2小时后,贴壁的比率约为23.5%,6小时时的贴壁比率增加到47.9%,而在12小时的时候有88.9%的细胞贴壁,在16小时以后细胞贴壁的比率均高于99%。在培养3天时,雪旺细胞数量较最初增长了3.9倍,而培养7天时增长了11.4倍。S-100和Sox-10双标荧光染色对雪旺细胞鉴定的纯度为97%。外泌体粒径主要分布在100-160 nm之间,本研究测得的外泌体的平均直径在125 nm。Western blot检测显示外泌体特异性蛋白CD63、TSG101、CD9在本研究所提取的雪旺细胞外泌体中均有表达,而非外泌体表达蛋白Rab5和Na+/K+ATP酶则未见表达。（2）外泌体在透明质酸凝胶中前3天释放比率较大,第一天释放比率为34%,第三天达到41%,随着时间的延长,释放逐渐缓慢。在第4、5、6、8、16、32天时的累积释放比率为43%、47%、51%、53%、75%、90%,而在第64天时候检测得出累积释放率为99%,几乎完全释放。对照组轴突数量为35.4±4.3,而外泌体刺激组为126.3±14.4（P<0.05）。在轴突生长长度方面,外泌体组的平均长度长达（1563.0±132.5）μm,显着高于对照组的（864.3±77.4）μm（P<0.05）。外泌体干预组雪旺细胞在培养后的第3、5、7天时细胞增殖水平均显着高于对照组（P<0.05）。外泌体刺激后的雪旺细胞分泌NGF、BDNF、髓鞘零蛋白（P0）、细胞极性蛋白Par-3的水平在培养后第3天和第5天较第1天时均显着升高,而第5天的表达量也均显着高于第3天的水平（P<0.05）。外泌体刺激后的DRG神经元细胞分泌的标志性蛋白进行检测,结果发现GAP-43、NF-200、βIII–Tubulin的水平在培养后第3天和第5天较第1天时均显着升高,而第5天的表达量也均显着高于第3天的水平（P<0.05）。（3）PCL神经导管的内孔直径为1500μm左右,而管壁的厚度约为500μm,表面纤维丝均匀分布,纤维丝平均直径为4.9μm。PCL神经导管孔隙率为（89.7±2.6）%、最大应力为（7.5±0.6）MPa、杨氏模量为（22.4±2.1）MPa、最大断裂张力为（596.4±33.8）%、最大载荷为（5.6±0.8）N,符合神经再生要求。术后第4、8、12周时PCL/HA-EXO组大鼠的再生神经有髓轴突的直径、有髓轴突的数量、再生轴突的面积显着高于PCL/HA组,而G-ratio值则显着低于PCL/HA组（P<0.05）。而三个时间点中,PCL/HA-EXO的有髓轴突的数量、再生轴突的面积和G-ratio值均与自体神经移植组差异无统计学意义（P>0.05）。术后12周时可见PCL/HA-EXO组大鼠轴突沿着导管顺行生长,有明显的方向性。并且神经轴突及雪旺细胞的表达显着高于PCL/HA组,与自体神经移植组差异不明显。各组大鼠术后随着时间的延长,复合肌动作电位幅度、神经传导速度及潜伏期均有所改善,但PCL/HA-EXO组和自体神经组较PCL/HA组改善更为明显,术后4、8、12周三个时间点均显着高于PCL/HA组（P<0.05）。在术后第8周时,PCL/HA-EXO组和自体神经移植组的神经传导速度及潜伏期均无显着性差异,而复合肌动作电位仍存在一些差异（P<0.05）。而术后12周时,三个指标则在PCL/HA-EXO组和自体神经移植组中无统计学差异（P>0.05）。PCL/HA-EXO组和自体神经移植组的SFI指数在术后三个时间点均显着高于PCL/HA组（P<0.05）,并且在术后第8,12周时PCL/HA-EXO组和自体神经移植组的SFI指数相似,无统计学差异（P>0.05）。术后12周PCL/HA-EXO组和自体神经移植组的腓肠肌纤维直径分别为（68.4±6.2）μm和（72.3±7.6）μm,显着高于PCL/HA组（P<0.05）,而PCL/HA-EXO组和自体神经移植组则无统计学差异（P>0.05）。结论:（1）本研究成功分离提取了新生SD大鼠雪旺细胞,纯度高,满足后续实验要求。采用超速离心法加超滤法能够成功提取雪旺细胞分泌的外泌体,经鉴定是雪旺细胞分泌的外泌体,纯度较高。（2）透明质酸水凝胶能够有效的包裹和缓释雪旺细胞分泌的外泌体,其缓释曲线与体内雪旺细胞增殖迁移及神经轴突再生的时间相似,能够更好的在体内应用。雪旺细胞分泌的外泌体能够有效的促进雪旺细胞增殖,促进雪旺细胞和神经元特异性蛋白分泌,能够较好的促进神经再生。（3）PCL/HA-EXO神经导管能够有效的促进大鼠长节段神经缺损的运动功能康复及组织学及电生理学明显改善。
梅思伟[5]（2018）在《不同修复方法对周围神经损伤后GAP-43蛋白及其mRNA表达影响的实验研究》文中研究指明目的:通过不同修复方法对周围神经损伤后GAP-43蛋白及其m RNA表达水平的差异来探讨临床上常用的神经修复方法,如神经外膜端-端吻合法、胶原蛋白神经套管套接法及自体神经外膜小间隙吻合法修复大鼠周围神经损伤的效果,并对周围神经损伤修复的机制进行一定的探究,以期对临床工作中周围神经损伤的治疗起到一定的参考价值。方法:选取两月龄S-D大鼠90只,体重约250g300g,随机分为3组,每组30只。分别为A、B、C三组:A组为神经外膜端-端吻合组,B组为胶原蛋白神经套管套接组,C组为自体神经外膜小间隙桥接组。A组切断大鼠左侧坐骨神经并予以原位神经外膜原位端-端吻合,B组离断后予以胶原蛋白神经套管套接,C组则予以自体神经外膜小间隙吻合。分别于术后第5、7、14、21、28天取出神经标本并进行Western Blot技术及RT-PCR技术检测再生神经组织中GAP-43蛋白及其m RNA表达情况,以比较三种不同方法修复周围神经损伤后再生神经内的GAP-43表达规律及差异。数据采用单因素方差分析,p<0.05为具有有统计学意义的差异。结果:三组不同修复方法修复周围神经损伤后再生神经内的GAP-43 m RNA及其蛋白表达均呈先增高后降低的趋势;其m RNA表达均在2周前后最多,而其蛋白含量在3周左右最多。人工神经套管组及自体神经外膜小间隙组GAP-43蛋白及m RNA的表达在各个时间点均多于端-端吻合组,且差异具有统计学意义。而神经套管组与自体神经外膜小间隙组相比,GAP-43蛋白及其m RNA的表达差异并不明显。结论:胶原蛋白神经套管套接及自体神经外膜小间隙桥接构建的神经再生室相对于神经外膜普通端-端吻合更有利于GAP-43蛋白及其m RNA的表达,对损伤神经修复具有一定的促进作用,是修复周围神经损伤的一种有效的吻合方法。
刘华蔚[6]（2014）在《面神经缺损修复及神经周瘢痕预防的相关研究》文中指出第一部分、壳聚糖导管预防周围神经瘢痕的实验研究实验一壳聚糖导管预防兔面神经周瘢痕的实验研究目的：周围神经解剖性损伤后，神经周瘢痕的形成会压迫神经，阻碍轴突的再生，影响神经功能的恢复。应用可生物降解的壳聚糖导管作为物理屏障，观察其对兔面神经周瘢痕及神经内血运的影响。方法：新西兰大白兔36只，行腮腺大部切除，面神经解剖性损伤造模。随机分为覆盖组、包裹组、自体对照组。于术后4、12周采用Petersen分级评估面神经与周围组织粘连情况，采用组织学染色方法检测面神经周瘢痕及神经内血管密度，并采用触须运动、透射电镜、神经电生理等方法对面神经功能进行评估。结果：术后4周时petersen评分无明显差异（P>0.05），12周时瘢痕粘连较明显，覆盖组与包裹组解剖时较自体对照组容易（P<0.01）；术后4周覆盖组有髓神经纤维直径、髓鞘厚度、神经纤维数量均优于包裹组及对照组，具有统计学意义（p<0.05）；术后4、12周对照组胶原厚度大于覆盖组与包裹组，差异有统计学意义（P<0.01）；术后12周覆盖组与自体对照组两者纤维直径较接近，排列均整齐，髓鞘壁较厚，两组间无明显差异（P>0.05），包裹组纤维直径、髓鞘壁厚度、神经内血管密度均较小，与前两者存在显着性差异，具有统计学意义（p<0.05）。结论：壳聚糖导管作为物理屏障覆盖于面神经表面可有效减少神经周瘢痕的形成、减轻瘢痕对面神经功能的影响。实验二、壳聚糖导管复合透明质酸预防大鼠坐骨神经瘢痕的实验研究目的：观察将壳聚糖导管与透明质酸联合应用对大鼠坐骨神经1cm钳夹性损伤后神经功能的影响。方法：选用清洁级健康成年SD大鼠60只，坐骨神经钳夹损伤造模，随机分为覆盖组、覆盖+透明质酸组、钳夹组、钳夹+透明质酸组，每组15只。于术后4、8、12周对坐骨神经与周围组织粘连、神经周瘢痕增生情况进行观察，并对神经功能进行坐骨神经功能指数、组织学和神经电生理检测。结果：术后4周时坐骨神经功能指数、petersen评分、神经纤维计数、髓鞘厚度、有髓神经纤维平均直径各组间均无明显差异；术后8周、12周时，钳夹+透明质酸组其坐骨神经功能指数、petersen评分、神经纤维计数、髓鞘厚度、有髓神经纤维平均直径等各项指标均优于对照组。术后4、8、12周时神经外膜胶原厚度检测各组均明显低于对照组，差异有统计学意义（p<0.01），12周时HA组神经外膜胶原厚度要厚于壳聚糖组及壳聚糖+HA组，差异有统计学意义（p<0.05）。结论：壳聚糖导管复合透明质酸可以促进鼠坐骨神经钳夹损伤的恢复，减少其神经周瘢痕的产生。实验三、壳聚糖导管植入对腮腺术后面神经功能恢复的临床效果观察目的：观察并比较壳聚糖导管应用于腮腺手术后对术后患者面神经功能恢复的影响。方法：75例腮腺肿瘤患者接受腮腺浅叶摘除术或腮腺全切手术，分为两组，一组应用壳聚糖导管覆盖面神经总干及各分支，一组为常规手术作为对照。在手术后7天、1月、3月、6月和9月分别进行超声检查和血常规检查并按HB标准观察面神经功能。结果：随访时间9月-50月，平均21.7月，75名患者中50名行腮腺浅叶摘除，25名行腮腺全切术，手术后不同时间的血常规检及超声查显示无论是应用壳聚糖组还对照组，患者均无异常，表明壳聚糖导管植入体内后不会引起不良反应。术后7天即刻面瘫发生率壳聚糖组（29/32，90.6%），对照组（39/43,90.7%）；永久性面瘫发生率面瘫发生率壳聚糖组（0/32，0%），对照组（2/43,4.7%）均无统计学差异（P>0.05）。术后7天对两组患者面神经功能行HB评分，结果两组患者面神经麻痹严重程度无显着性差异（P>0.05）。对患者面神经恢复速度进行检测，发现壳聚糖组神经恢复速度快于对照组，差异有显着性意义（P<0.01）。结论：壳聚糖导管具有良好的生物相容性，植入体内无不良反应，在腮腺手术后应用壳聚糖导管覆盖面神经对其功能恢复有一定促进作用。第二部分GDNF基因慢病毒载体的构建、病毒的包装及MSCs细胞的转染目的：构建携带EGFP和GDNF的慢病毒载体，利用其转染MSCs并对其进行鉴定，获得可稳定过表达GDNF的MSCs。方法：通过PCR扩增，BamHI和AscI双酶酶切目的基因片段， T4DNA连接酶连接,将目的基因GDNF插入慢病毒载体pLenti6.3MCSIRES2-EGFP,构建重组慢病毒。在lipofectamine2000介导下将构建成功的慢病毒转染人胚肾细胞系（293T），包装生产慢病毒,并测定病毒滴度。将包装好的慢病毒感染BMSCs,并对转染的细胞行病毒转染复数（MOI值）测定，筛选最佳感染复数。Western、RT-PCR分别检测转然后GDNF蛋白和mRNA的表达情况，流式细胞仪观察转染效率。结果：成功构建携带EGFP和GDNF的慢病毒，慢病毒转染MSCs后96小时强荧光表达，当MOI值为25时细胞荧光表达强且活性较好。Western和RT-PCR检测证实GDNF在MSCs中成功表达，流式细胞仪观察转染效率为94.2%。结论：成功将携带EGFP和GDNF的慢病毒转染MSCs，获得过表达GDNF基因的MSCs，为后期实验提供基础。第三部分、脱细胞神经复合GDNF转染的间充质干细胞修复兔面神经缺损的实验研究实验一、周围神经脱细胞方法的筛选目的：采用不同的方法对兔面神经进行脱细胞处理，对脱细胞神经组织学及体内植入进行检测，为面神经脱细胞方法的选择提供实验依据。方法：分别采用冻融法、化学法及冻融+酶消化法处理兔面神经，对处理的神经进行HE染色、扫描电镜观察和透射电镜观察其组织学结构；并将不同方法处理的神经进行兔背部皮下植入，于2、4周处死动物，行大体观察及组织学观察。结果：组织学观察见化学法（Hudson法）、冻融+酶消化法处理的神经其髓鞘清除较彻底，只有部分区域可见极少量髓鞘残留，冻融法处理的神经内可见髓鞘皱缩、变形但有较多残留。皮下埋植实验观察见单纯冻融法处理的神经内淋巴细胞浸润稍多，主要分布在神经束周边的基底膜间隙中，Hudson法、冻融+酶消化法处理的神经未见明显的炎性细胞浸润。结论：冻融+酶消化法处理方法简单、神经支架结构保存完整，神经内髓鞘等抗原成分去除较彻底，是一种良好的去细胞方法，为后期实验提供基础。实验二、脱细胞神经复合GDNF转染的MSCs修复兔面神经缺损目的：以脱细胞面神经为支架，复合GDNF转染的MSCs修复兔面神经多分支缺损，观察其对面神经再生及对面神经元存活的作用。方法：新西兰大白兔60只，面神经解剖性损伤造模。完全随机分为：脱细胞同种异体神经移植组（ANA），脱细胞异体神经+间充质干细胞组（AN-MSCs），脱细胞异体神经+GDNF转染的间充质干细胞（AN-G-MSCs），自体神经移植组（Control）。于术后4、12、24周时取材，对动物行大体观察并采用触须运动、神经电生理等方法对面神经功能进行评估，分别对移植神经的近端及远端行甲苯暗蓝染色、透射电镜观察其再生轴突的变化。结果：对面神经总干处神经轴突形态计量学分析发现，术后4周时脱细胞神经移植组其神经轴突计数、髓鞘厚度、髓鞘直径均明显低于其他三组，差异有统计学意义（P<0.05）；术后12、24周时检测发现各组间无明显差异（P>0.05）。面神经移植物远端术后12周时面神经各分支检测脱细胞神经移植与MSCs组神经轴突计数、髓鞘厚度、髓鞘直径均明显低于GDNF组与自体神经移植组，差异有统计学意义（P<0.05）。术后24周时脱细胞神经移植各项指标均低于其他三组.结论：将脱细胞神经与GDNF转染的MSCs联合应用可成功修复兔面神经多分支缺损，其修复效果优于单纯应用脱细胞神经，且可以一定程度上保护面神经元的存活。实验三同种异体神经移植修复面神经缺损的长期随访观察目的：临床应用脱细胞神经移植修复面神经缺损，并进行长期的随访，观察其修复效果及安全性。方法：2004年7月至2013年7月，因外伤或腮腺恶性肿瘤侵袭术中切除导致的面神经缺损44例，最终共有35例神经缺损修复患者完成随访观察，其中自体神经移植20例，脱细胞神经移植15例。术后最短随访时间为9个月，随访时分别进行局部超声检查和血常规检查，并按HB标准观察面神经功能。结果：随访时间9月-9年，面神经缺损长度10mm-50mm，其中术中一期缺损修复26例，二期手术移植9例，二期手术距损伤时间2天-3个月。术后随访时的血常规检及超声查均未发现无异常，表明脱细胞神经植入体内后未引起明显的不良反应。最终自体神经移植组与脱细胞神经移植组有意义的功能恢复分别为85%（17/20）和80%（12/15），无统计学差异（P>0.05）；术后HB分级比较发现脱细胞神经移植神经功能恢复情况稍弱于自体神经移植，但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：采用脱细胞神经在临床上修复面神经缺损并进行长期的随访观察，结果发现脱细胞神经可以修复面神经缺损，长期随访未发现明显的不良反应，其修复与自体神经移植接近。脱细胞神经移植可成为临床面神经缺损修复的一种选择。
刘华蔚[7]（2011）在《壳聚糖导管复合NGF缓释微球修复兔面神经缺损的实验研究》文中指出目的：研制神经生长因子（nerve growth factor, NGF）缓释微球,通过微球复合壳聚糖导管修复兔面神经缺损,从而观察持续释放的NGF在相对稳态的壳聚糖导管中对面神经生长的促进作用。方法：（1）采用复乳-溶剂挥发法（W/O/W）及聚合物合金法与乳化-溶剂挥发法（S/O/W）结合制备NGF缓释微球,对所制微球一般性质及体外释药性能进行检测,扫描电镜观察微球的形态、粒径,NGF含量采用酶联免疫吸附测定（ELISSA）法测定,释放液中NGF活性采用PC12细胞测定。（2）选择2.5-3kg的新西兰大白兔36只,无菌条件下切断右侧面神经颊支,制成10mm的兔面神经颊支缺损模型。完全随机分组方法分成四组（每组9只）：A：壳聚糖导管复合NGF缓释微球（10mg）组、B：壳聚糖导管复合单纯NGF（5μg）组、C：壳聚糖导管复合生理盐水组、D：自体神经移植组。每组随机分为三个亚组（每个亚组3只）,分别于术后1个月,2个月,3个月行大体观察、神经直径测量、神经电生理检测、组织化学和免疫组织化学和电镜观察。结果：传统复乳法NGF缓释微球包封率（23.74%）,聚合物合金法NGF缓释微球包封率（49.46%）,传统复乳法可持续释放有活性NGF达60d以上,聚合物合金法可持续释放有活性NGF达90天。术后1个月、2个月、3个月A组在神经传导速度及形态学中的有髓神经纤维数、髓鞘厚度等均优于B及C组,和D组的结果基本相似。结论：聚合物合金法较传统复乳法制备的NGF缓释微球包封率高,体外试验其性质稳定,释放有活性的NGF时间长。聚合物合金法制备的微球与壳聚糖导管联合应用修复兔面神经缺损效果明显,与自体移植组效果相近,明显优于对照组。因此壳聚糖导管复合NGF缓释微球对兔面神经缺损的修复有明显的促进作用。
宁丽娜,熊杰[8]（2011）在《神经组织工程支架或异种神经移植在面神经缺损中的应用》文中研究说明背景:了解面神经损伤的修复方法,以及各种组织支架的特性与优势,对于修复方法与材料的合理选择是十分必要的。目的:总结神经组织工程支架或异种神经移植在面神经缺损中的应用进展。方法:应用计算机检索PubMed数据库及CNKI数据库,在标题和摘要中以"组织工程支架,神经移植,面神经,修复"或"tissue engineering scaffolds,nerve trans plantation,facial,repair"为检索词进行检索。根据纳入标准选择21篇文献进行综述。结果与结论:面神经缺损后立即直接缝合神经的断端是最好的修复方法。自体神经移植受神经移植体来源之限,常造成供区失神经支配;以及产生束外有髓和无髓轴突无规则生长会导致神经纤维错向再生,造成严重的联带运动的不足。异体或异种神经移植法虽然取得了一定的效果,但仍处于动物实验的研究阶段,尚难以应用于临床。
刘华蔚,温伟生[9]（2010）在《神经组织支架材料修复面神经缺损的研究进展》文中提出利用组织工程技术修复面神经缺损成为面神经缺损修复的新的治疗方法。其中,神经组织支架材料成为主要研究热点。现就神经组织支架材料在面神经修复的中的研究进展作一综述。
李清华[10]（2008）在《复合桥与他克莫司修复兔面神经缺损的实验研究》文中研究说明【目的】观察异种去细胞神经基质复合自体翻转静脉修复兔长距离面神经缺损的修复效果及全身应用他克莫司时的神经再生情况,分析他克莫司在长距离面神经缺损修复过程中的作用,探讨异种去细胞神经基质复合自体翻转静脉的复合桥在兔长距离面神经缺损修复过程中的作用机制,为临床修复长距离面神经缺损、促进面神经再生提供实验基础。【方法】将30只新西兰大白兔按随机分配原则,分为三组。实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组各10只。实验组Ⅰ左侧面神经缺损以面神经同位移植修复,实验组Ⅱ左侧面神经缺损修复方法同Ⅰ组,并全身应用他克莫司,实验组Ⅲ左侧面神经以复合桥修复左侧面神经缺损并全身应用他克莫司;实验组Ⅰ右侧面神经不做任何处理,用做正常对照组,实验组Ⅱ、Ⅲ右侧面神经均留作缺损对照。于术后16周进行大体观察、神经电生理检测,并处死30只动物,取材行HE染色、Masson三色法染色观察神经再生情况,采用图像分析软件量化计算神经再生量并评价神经再生质量。【结果】（1）复合桥修复组其翻转静脉在面神经再生过程中吸收明显且无异物反应,能有效抑制神经纤维瘤的形成,可为神经再生提供良好的微环境。（2）神经电生理检测结果显示异种去细胞神经基质复合自体翻转静脉修复面神经缺损后神经肌肉功能恢复良好,虽然再生轴突成熟度和有髓神经面积恢复率略低于正常,但是与原位吻合组相似,而且功能也与神经原位吻合相似。（3）再生神经组织学观察显示全身应用他克莫司组的再生轴突成熟度优于非他克莫司组,但是在本实验的观察时间内两组神经传导功能没有统计学差异。【结论】（1）异种去细胞神经基质有效消除了细胞等抗原成分,保留了基底膜管,具有天然的三维立体结构,是理想的神经再生支架材料;（2）异种去细胞神经基质和自体翻转静脉联合应用,具有明显的协同作用,可以提供大量有助于神经再生的种子细胞并有助于形成适合神经再生的微环境,有利于长距离面神经缺损的修复;（3）他克莫司能有效抑制面神经损伤后引起的免疫反应,可能对面神经损伤后再生有积极作用;除免疫抑制作用外,他克莫司还能通过其他机制,如神经营养、干预细胞凋亡等促进面神经损伤后再生,加快面神经轴突成熟。充分明确他克莫司的这一作用还有待做进一步的动物实验和临床研究。
二、自体神经组织匀浆修复面神经缺损的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、自体神经组织匀浆修复面神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
（1）四种冷冻保护剂玻璃化法保存人指固有神经的实验研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 同种异体神经移植修复周围神经损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）定向诱导去分化脂肪（d-DFAT）细胞对大鼠面神经缺损的修复作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第1章 DFAT细胞和ASCs的分离、培养及鉴定 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.2.1 实验动物 |
| 1.2.2 实验试剂 |
| 1.2.3 实验器械 |
| 1.2.4 相关试剂 |
| 1.2.5 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 DFAT细胞及ASCs的体外培养及传代 |
| 1.3.2 DFAT细胞及ASCs成骨、成脂诱导结果 |
| 1.3.3 DFAT细胞及ASCs图像流式鉴定结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 第2章 脂肪来源干细胞诱导成类雪旺样细胞 |
| 2.1 概述 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 实验器械 |
| 2.2.3 相关试剂 |
| 2.2.4 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 DFAT细胞及ASCs诱导过程中细胞形态变化 |
| 2.3.2 类雪旺样细胞(d-DFAT细胞、d-ASCs)的鉴定 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第3部分 脂肪组织来源种子细胞与生物凝胶复合神经导管修复大鼠面神经颊支缺损的研究 |
| 3.1 概述 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 实验器械 |
| 3.2.4 相关试剂 |
| 3.2.5 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 实验动物情况 |
| 3.3.2 触须运动评估 |
| 3.3.3 神经电生理评估 |
| 3.3.4 甲苯胺蓝染色 |
| 3.3.5 NF-200+GFAP+β-TubulinⅢ染色 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第4部分 构建3D定向诱导去分化脂肪(d-DFAT)细胞聚合体 |
| 4.1 概述 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 实验试剂 |
| 4.2.2 实验器械 |
| 4.2.3 相关试剂 |
| 4.2.4 方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 3D d-DFAT细胞聚合体形成情况 |
| 4.3.2 3D d-DFAT细胞聚合体的组织学评估 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 总结与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（3）股神经分支基膜管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验器材与试剂 |
| 1.3 实验设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 大鼠股神经及其分支的获取 |
| 2.2 应用蛋白芯片检测股神经分支差异蛋白的表达 |
| 2.3 使用透射电镜对股神经分支基底膜和髓鞘的超微结构进行观察 |
| 2.4 对神经进行化学去细胞处理 |
| 2.5 组织学评价 |
| 2.6 DNA含量测定 |
| 2.7 使用扫描电子显微镜对股神经分支的表面微观结构进行观察 |
| 2.8 拉曼光谱分析 |
| 2.9 两种神经移植物的构建 |
| 2.10 大鼠坐骨神经缺损动物模型的建立 |
| 2.11 坐骨神经功能恢复评价 |
| 2.12 再生坐骨神经的组织学评价 |
| 2.13 坐骨神经靶器官的组织学评价 |
| 2.14 技术路线图 |
| 3 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 大鼠股神经的获取 |
| 2 差异表达蛋白的获取及生物信息学分析 |
| 3 蛋白芯片验证的免疫荧光验证 |
| 4 股神经组织学及超微结构评价 |
| 5 去细胞股神经分支的评价 |
| 6 坐骨神经功能恢复评价 |
| 7 再生坐骨神经的组织学评价 |
| 8 运动靶器官(腓肠肌)的组织学评价 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文 |
（4）透明质酸水凝胶缓释雪旺细胞外泌体修复坐骨神经长节段缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、外泌体的分离与鉴定 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 主要材料与试剂 |
| 1.1.2 主要仪器和设备 |
| 1.1.3 主要试剂配置方法 |
| 1.1.4 实验方法 |
| 1.1.5 统计学分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 雪旺细胞的形态 |
| 1.2.2 雪旺细胞在体外的贴壁和增殖活性 |
| 1.2.3 雪旺细胞体外培养纯度鉴定 |
| 1.2.4 雪旺细胞分泌的外泌体的形态和粒径鉴定 |
| 1.2.5 雪旺细胞分泌的外泌体表面标志物的鉴定 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 二、外泌体的体外生物学功能及体外缓释研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 主要材料与试剂 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 |
| 2.1.3 主要试剂配置方法 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.1.5 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 透明质酸水凝胶包裹雪旺细胞外泌体及体外缓释曲线 |
| 2.2.2 雪旺细胞外泌体促进DRG组织轴突生长 |
| 2.2.3 雪旺细胞外泌体对雪旺细胞增殖的影响 |
| 2.2.4 雪旺细胞外泌体对雪旺细胞生物活性物质表达的影响 |
| 2.2.5 雪旺细胞外泌体对DRG神经元的生物活性物质表达影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、雪旺细胞外泌体促进大鼠长节段坐骨神经缺损修复 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要材料和试剂 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 |
| 3.1.3 实验动物及分组 |
| 3.1.4 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 扫描电镜观察电纺PCL导管大体及微细结构 |
| 3.2.2 静电纺丝PCL神经导管的力学参数和孔隙率 |
| 3.2.3 雪旺细胞外泌体促进神经轴突再生 |
| 3.2.4 NF-200和S100 对各组再生神经的免疫荧光染色 |
| 3.2.5 三组大鼠坐骨神经电生理参数比较 |
| 3.2.6 三组大鼠坐骨神经指数比较 |
| 3.2.7 三组大鼠荧光金逆行示踪 |
| 3.2.8 三组大鼠腓肠肌HE染色分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 附录 |
| 综述 外周神经损伤修复的材料与治疗进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）不同修复方法对周围神经损伤后GAP-43蛋白及其mRNA表达影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 主要试剂与材料 |
| 1.2 主要实验仪器设备 |
| 1.3 常用溶液的配制 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 实验模型的制作 |
| 2.2 神经标本的制备 |
| 2.3 定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）检测GAP 43 在不同实验组中的mRNA表达量 |
| 2.4 蛋白质印迹（Western blot，WB） |
| 3.数据统计分析 |
| 结果 |
| 1. 成功构建大鼠动物实验模型 |
| 2. 定量PCR检测GAP-43 在不同实验组中的MRNA表达量 |
| 3. WESTERN BLOT法检测再生神经GAP-43 蛋白表达在不同实验组中的表达量 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 周围神经损伤的治疗现状及发展 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词汇表 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
（6）面神经缺损修复及神经周瘢痕预防的相关研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 壳聚糖导管预防周围神经瘢痕的实验研究 |
| 实验一 壳聚糖导管预防兔面神经周瘢痕的实验研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 实验二 壳聚糖导管复合透明质酸预防大鼠坐骨神经瘢痕的实验研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 实验三、壳聚糖导管植入对腮腺术后面神经功能恢复的临床效果观察 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 第一部分 小结 |
| 第二部分 GDNF 基因慢病毒载体的构建、病毒的包装及细胞转染 |
| 实验一 GDNF 基因慢病毒载体的构建及慢病毒的包装 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 实验二、兔骨髓间充质干细胞的培养及诱导鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 实验三、携带 EGFP 和 GDNF 的慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 第二部分 小结 |
| 第三部分 脱细胞神经复合 GDNF 转染的间充质干细胞修复兔面神经缺损的实验研究 |
| 实验一 周围神经脱细胞方法的改良 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 实验二、脱细胞神经复合 GDNF 转染的 MSCs 修复兔面神经缺损 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 附图 |
| 实验三 同种异体神经移植修复面神经缺损的长期随访观察 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 典型病例介绍 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 附图 |
| 第三部分小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述一 周围神经瘢痕的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 脱细胞神经移植研究进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩略语词表 |
| 个人简介 |
| 博士期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（7）壳聚糖导管复合NGF缓释微球修复兔面神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 NGF微球的制备及特性的研究 |
| 1. 材料和方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 第二部分 壳聚糖导管复NGF缓释微球修复兔面神经缺损的实验研究 |
| 1. 材料和方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 英文缩略语词表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（8）神经组织工程支架或异种神经移植在面神经缺损中的应用（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 入选标准 |
| 1.3 资料提取 |
| 1.4 质量评价 |
| 2 结果 |
| 2.1 自体组织 |
| 2.2 异种移植物 |
| 2.3.1 导管支架 |
| 2.3.2 干细胞 |
| 2.3.3 许旺细胞 |
| 2.4 神经营养因子 |
| 3 小结 |
（9）神经组织支架材料修复面神经缺损的研究进展（论文提纲范文）
| 1. 神经组织支架材料 |
| 1.1 天然材料 |
| 1.2 合成材料 |
| 2. 支架材料与种子细胞联合应用 |
| 2.1 Sch w ann细胞 |
| 2.2 干细胞 |
| 3. 支架材料与神经营养因子的联合应用 |
| 4. 其它 |
| 5. 问题与展望 |
（10）复合桥与他克莫司修复兔面神经缺损的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 致谢 |
四、自体神经组织匀浆修复面神经缺损的实验研究（论文参考文献）
- [1]四种冷冻保护剂玻璃化法保存人指固有神经的实验研究[D]. 戴依娜. 遵义医科大学, 2021(01)
- [2]定向诱导去分化脂肪（d-DFAT）细胞对大鼠面神经缺损的修复作用[D]. 唐安群. 南昌大学, 2020(08)
- [3]股神经分支基膜管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究[D]. 魏帅. 石河子大学, 2019(01)
- [4]透明质酸水凝胶缓释雪旺细胞外泌体修复坐骨神经长节段缺损的实验研究[D]. 王宇强. 天津医科大学, 2019(02)
- [5]不同修复方法对周围神经损伤后GAP-43蛋白及其mRNA表达影响的实验研究[D]. 梅思伟. 苏州大学, 2018(01)
- [6]面神经缺损修复及神经周瘢痕预防的相关研究[D]. 刘华蔚. 中国人民解放军医学院, 2014(03)
- [7]壳聚糖导管复合NGF缓释微球修复兔面神经缺损的实验研究[D]. 刘华蔚. 中国人民解放军军医进修学院, 2011(10)
- [8]神经组织工程支架或异种神经移植在面神经缺损中的应用[J]. 宁丽娜,熊杰. 中国组织工程研究与临床康复, 2011(21)
- [9]神经组织支架材料修复面神经缺损的研究进展[J]. 刘华蔚,温伟生. 口腔颌面修复学杂志, 2010(02)
- [10]复合桥与他克莫司修复兔面神经缺损的实验研究[D]. 李清华. 昆明医学院, 2008(10)