一、草莓病毒病研究现状、脱毒技术及病毒鉴定研究进展（论文文献综述）
陈晗,徐洪国,白婧,德青曲珍,钱立娟,祁宏英[1]（2022）在《草莓病毒病及脱毒技术研究现状》文中研究表明草莓富含营养物质,且口感极佳,深受人们的喜爱,但因病毒病害不断加重,导致产量降低、效益下降。为提高经济效益,生产上常采用栽培脱毒苗实现高产高效。本文综述了危害草莓的四大病毒病,并介绍了3种主要的脱毒技术,旨在为草莓栽培提供理论依据。
马秀明,缪军,王俊峰,韩伟,孙杨[2]（2021）在《草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展》文中进行了进一步梳理草莓茎尖脱毒技术能够从生产上解决草莓因长期无性繁殖,易受到多种病毒的侵染,从而导致植株长势变弱、果实品质劣化、产量下降等品种退化现象。从草莓茎尖消毒、茎尖选取、培养基的筛选、多种脱毒方式结合、病毒检测、驯化移栽、种苗繁育等方面综述了草莓茎尖脱毒繁育体系的研究进展,以期为草莓茎尖脱毒繁育体系的建立提供参考。
王佳[3]（2021）在《我国部分省市草莓种苗病毒种类检测与序列分析》文中指出随着草莓保护地栽培面积的增加和无性繁殖种苗的繁殖与调运,草莓病毒病的发生与流行日益严重。为明确侵染我国部分省市草莓种苗的病毒种类,本文应用小RNA深度测序技术对来自北京、河北、内蒙古、四川、辽宁、云南和陕西7个省市草莓种苗病毒病进行检测,经RT-PCR验证发现仅在‘红颜’种苗中检出草莓镶脉病毒（strawberry vein banding virus,SVBV）、草莓斑驳病毒（strawberry mottle virus,SMo V）和草莓轻型黄边病毒（strawberry mild yellow edge virus,SMYEV）3种病毒,病毒复合侵染普遍发生。不同省市的‘红颜’种苗病毒检出率和病毒种类具有明显差异,且检出的SVBV和SMo V分离物的部分核苷酸序列同源性分别为97.98%～99.8%和98.12%～99.34%。SMYEV辽宁分离物lnhy26的cp基因核苷酸序列与中国甘肃分离物sy02的同源性高达99.02%。为进一步明确不同品种草莓种苗病毒病发生情况,对来自北京和河北的33个品种草莓种苗病毒病进行调查及RT-PCR检测,明确侵染不同草莓品种的主要病毒种类是SVBV、SMo V、SMYEV和黄瓜花叶病毒（cucumber mosaic virus,CMV）4种病毒,且存在8种不同的病毒复合侵染类型。不同品种的草莓种苗病毒检出率和病毒种类具有明显差异。不同品种草莓种苗上检出的SVBV和SMo V分离物的部分核苷酸序列同源性分别为98.51%～100%和91.11%～100%。SMYEV北京爱莎分离物bjash6的cp基因核苷酸序列与中国甘肃分离物sy02同源性为98.31%。2个CMV不同品种分离物的部分cp基因核苷酸序列同源性为100%,隶属亚组ⅠA。为明确SMYEV辽宁分离物lnhy26的分子变异情况,扩增获得SMYEV辽宁分离物lnhy26约5 890 nt的核苷酸序列,其ORF1～ORF5基因核苷酸序列与Gen Bank上已登录的分离物的同源性为84.29%～99.02%,氨基酸序列同源性为86.87%～99.17%,基因重组分析均未发现重组事件。利用实时荧光定量PCR检测发现同一植株不同叶片中的SVBV和SMo V的含量差异显着,距离生长点较远的叶片SVBV含量较多,而SMo V与之相反。
夏冰[4]（2021）在《草莓病毒病的发生及绿色防控》文中研究表明草莓生产效益高,在我国栽培面积迅速扩大,但由于种苗管理和植保措施不到位,草莓病毒病发生呈蔓延趋势,为害逐渐加重,造成植株生长不正常,产量和品质下降,严重制约了草莓产业的发展。本文介绍了几种主要草莓病毒的分类地位、发病症状、传播方式、检测技术和绿色防控技术,为草莓病毒病的科学诊断和防治提供借鉴。
霍辰思,樊新萍,刘伟[5]（2020）在《草莓病毒病、脱毒技术及病毒检测研究进展》文中认为针对草莓主要病毒病及其为害特点、草莓脱毒主要技术及病毒检测技术进行综述,介绍了近年来草莓脱毒苗繁育技术,以期对草莓生产提供理论指导作用。
杨涵,关统伟,徐红星,靳芙蓉,胡小朋[6]（2020）在《草莓有害病毒种类与防治技术》文中进行了进一步梳理草莓营养价值丰富,是世界上广泛栽培的重要经济作物,但由病毒侵染引起的草莓病害给生产带来了巨大的经济损失,严重制约了草莓产业的健康发展。本文对目前已报道的22种主要草莓病毒进行了分类,详细介绍了草莓斑驳病毒、草莓镶脉病毒、草莓轻型黄边病毒和草莓皱缩病毒等4种在生产上危害最为严重的病毒,并综述了国内外草莓病毒性病害的防治方法,同时对未来草莓病毒性病害的防治工作进行了展望,以期为从事草莓栽培工作的生产技术人员提供参考。
苏代发,童江云,杨俊誉,陈杉艳,罗志伟,沈雪梅,赖泳红,Jamil Arslan,魏世杰,崔晓龙[7]（2019）在《草莓病毒病及其研究进展》文中提出对草莓镶脉病毒（strawberry vein banding virus, SVBV）、草莓斑驳病毒（strawberry mottle virus, SMoV）、草莓皱缩病毒（strawberry crinkle virus, SCV）、草莓轻型黄边病毒（strawberry mild yellow edge virus, SMYEV）和草莓潜隐环斑病毒（strawberry latent ringspot virus, SLRSV）等5种草莓主要病毒的分类、分布及生物学特性进行了综述.在此基础上,对草莓病毒的检测方法（指示植物检测、电镜检测、血清学检测和分子生物学检测）、传播媒介（蚜虫、蓟马、粉虱、线虫和真菌）、脱毒方法（高温脱毒、化学试剂脱毒、茎尖脱毒、高温-茎尖结合脱毒和超低温脱毒）及草莓病毒病的防治（脱毒苗运用、田间管理、抗病毒品种和阻断传播媒介）等方面进行了论述,以期为草莓生产中病毒病的防治提供科学依据.
韩晓玉[8]（2019）在《河南省草莓病毒病病原的鉴定及病毒cDNA克隆侵染体系的探索》文中提出草萄（Fragaria ×ananassa,DDuch.）是一种经济价值较高的园艺植物,目前已在世界各地广泛种植,由于草莓栽培主要依靠匍匐茎及其分枝进行无性繁殖,容易引起草莓衰退病,导致草莓叶片畸形、叶脉皱缩、植株矮化等症状,从而大大降低了草莓果实的产量和品质,严重影响了草莓的经济价值。目前河南省草莓病毒病的发生分布情况尚不清楚,鉴于此,本研究通过采集河南省5个地区的草莓病叶,确定了河南省引起草莓病毒病的主要病原,建立了5种草莓病毒病的多重PCR检测体系,同时探索了实验室已有的两种主要草莓病毒的cDNA克隆接种体系,为河南省草莓病毒病的防控提供了理论依据和技术支撑。主要实验结果如下:通过采集河南省郑州市、新乡市、洛阳市、焦作市和平顶山市的草莓叶片病样,利用设计的草莓病毒病特异性引物进行RT-PCR检测,结果表明郑州市引起草莓病毒病的病原主要是草莓镶脉病毒（Strawberry vein banding virus,SVBV）、草莓坏死休克病毒（Strawberrynecrotic shock virus,SNSV）和草萄白化病毒（Strawberry pallidosiis-assodatedd virus,SPaV）。新乡市引起草莓病毒病的病原主要有草萄斑驳病毒（Strawberry mottle virus,SMoV）、SVBV、SPaV。洛阳市引起草莓病毒病的病原主要有草莓轻型黄边病毒（Strawberry virus,SMYEV）、SVBV 和 SMoV。平顶山市引起草莓病毒病的病原主要有SVBV、SMYEV。焦作市引起草莓病毒病的病原主要有SVBV。在五个地区中都能检测到SVBV,在洛阳市发现了 SMoV和SVBV的复合侵染,在平顶山市发现了 SVBV和SMYEV的复合侵染。基于SPaV为国内首次发现,通过分段扩增的方式获得了 SPaV的全长序列,RNA1 为 8066 bp,RNA2 为 7978 bp。通过扩增SVBV不同分离物的cp全长阅读框,进行系统进化分析,结果表明,5个分离物与中国的其他分离物都聚为一个大支,加拿大分离物单独一支,郑州分离物与合肥分离物的亲缘关系最近。通过扩增SNSV的cp全长阅读框,进行系统进化分析,结果表明郑州市的SNSV分离物与美国的弗罗里达州（GenBank No.AY363235.1）的SNSV分离物亲缘关系最近,与美国和澳大利亚的分离物聚为一个大支,而日本分离物单独形成一个分支。此外,根据已获得的5种草莓病毒的序列,设计特异性引物,通过摸索退火温度和时间,建立了5种草莓病毒的多重PCR扩增体系,扩增长度分别为SVBV 816 bp、SMoV 620 bp、SMYEV 444 bp、SPaV 276 bp和SNSV 134 bp。通过真空抽滤和摩擦接种SMYEV和SMoV,结果表明两次摩擦接种SMoV的接种效率分别为2/3和1/3,两次真空抽滤SMoV接种效率分别为1/4和1/2,两次真空抽滤SMYEV接种效率分别为1/6和2/11。通过农杆菌浸润本生烟表明两种病毒在接种叶上都能侵染,而在系统叶片中未能检测到。
杨波,赵宝龙,郝小军,都业娟,何旺[9]（2018）在《新疆地区四种草莓病毒病原的检测》文中指出【目的】研究新疆草莓病毒病病源种类及田间发生情况,建立主要病毒病原多重RT-PCR检测体系,为无病毒草莓生产提供理论和技术支持。【方法】利用已报道的4种草莓主要病毒病原4对特异性引物,分别对新疆主要草莓种植区采集表现疑似病毒病症状的草莓样品共450份,采用单一反转录PCR（RT-PCR）及多重PCR对采集的样品进行检测,分析新疆草莓病毒病的发生情况。【结果】感染新疆草莓有3种主要病毒,南北疆15个不同栽培区均能检测出这3种病毒,每个采集地的病毒检出率均在26%以上。所有样品中病毒总检出率为64. 22%;其中,草莓镶脉病毒（strawberry vein banding virus,SVBV）检出率最高,为51. 78%;草莓斑驳病毒（strawberry mottle virus,SMoV）检出率为23. 78%,草莓轻型黄边病毒（strawberry mild yellow edge virus,SMYEV）检出率为9. 33%,草莓皱缩病毒（Strawberry crinkle virus,SCV）没有检出。病毒复合侵染率达18. 45%,两种病毒病复合侵染检出率为16. 67%,三种病毒病复合侵染检出率为1. 78%;所有样品中对3种病毒的多重RT-PCR与单一RT-PCR检测结果一致。【结论】新疆草莓受SVBV、SMoV和SMYEV三种病毒危害,单一病毒病感染率以及两种以上病毒复合侵染侵染率都较高,在无病毒种苗的培育和生产中加强病毒检测。
杨波[10]（2018）在《新疆草莓病毒病检测及脱毒繁育体系建立》文中提出本实验在调查新疆草莓病毒病感染的基础上,对新疆草莓主要病毒病进行分子检测,并建立草莓主要病毒病原多重RT-PCR检测体系,为新疆无病毒草莓生产提供理论和技术支持。同时本实验采用‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三种草莓品种的茎尖为试验材料筛选其适合的初代、继代和生根培养基配方;通过热处理结合茎尖组培筛选出适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三种草莓品种脱毒的温度,研究内容如下:1、新疆草莓主要病毒分子检测利用已报道的4种草莓主要病毒病原4对特异性引物,分别对新疆主要草莓种植区随机采集草莓样品共450份样品,采用单一反转录PCR（RT-PCR）及多重PCR对采集的样品进行检测,分析新疆草莓病毒病的发生情况。检测结果发现感染新疆草莓有3种主要病毒。所有样品中病毒总检出率为64.22%;其中,SVBV检出率最高,为51.78%;SMoV检出率为23.78%,SMYEV检出率为9.33%,SCV没有检出。通过对复合侵染情况分析,病毒复合侵染率达18.45%,两种病毒病复合侵染检出率为16.67%,三种病毒病复合侵染检出率为1.78%;所有样品中对3种病毒的多重RT-PCR与单一RT-PCR检测结果一致,说明该多重RT-PCR检测方法可靠。多重RT-PCR采用20μl体系,所用SMoV（219 bp）、SMYEV（271 bp）、SVBV（574 bp）引物浓度分别为:0.4μl、0.35μl、0.25μl;最适退火温度为55℃。新疆草莓受SVBV、SMo V和SMYEV三种病毒危害,病毒病感染率总体较高,在草莓生产中需要生产中加强病毒检测和无病毒种苗的繁育。2、新疆草莓无病毒苗繁育体系建立（1）适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种的初代培养基分别为:‘红颜’MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;‘甜查理’MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA;‘京藏香’MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA。（2）适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种的继代培养基分别为:‘红颜’MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;‘甜查理’MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA;‘京藏香’MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA。（3）适合‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种的生根培养基为1/2MS+0.1mg/L IBA。（4）‘随着温度的不断升高成活率在不断下降,SMoV和SMYEV热处理容易脱除。‘红颜’、‘甜查理’和‘京藏香’三个草莓品种,热处理结合茎尖组培病毒病脱除率为100%的温度分别为:‘红颜’39℃热水中处理4个小时;‘甜查理’40℃热水中处理4个小时;‘京藏香’40℃热水中处理4个小时。
二、草莓病毒病研究现状、脱毒技术及病毒鉴定研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、草莓病毒病研究现状、脱毒技术及病毒鉴定研究进展（论文提纲范文）
（1）草莓病毒病及脱毒技术研究现状（论文提纲范文）
| 1 草莓病毒病的发现及危害 |
| 2 脱毒技术 |
| 2.1 草莓组织培养脱毒 |
| 2.1.1 草莓茎尖组培脱毒 |
| 2.1.2 草莓花药组培脱毒 |
| 2.2 超低温脱毒 |
| 2.3 热处理钝化脱毒 |
| 3 小结 |
（2）草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展（论文提纲范文）
| 1 茎尖消毒 |
| 2 茎尖选取 |
| 3 培养基筛选 |
| 3.1 诱导培养基筛选 |
| 3.2 增殖培养基筛选 |
| 3.3 生根培养基筛选 |
| 4 多种脱毒方式结合 |
| 5 病毒检测 |
| 6 驯化移栽 |
| 7 种苗繁育 |
| 8 其他 |
| 9 小结与展望 |
（3）我国部分省市草莓种苗病毒种类检测与序列分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 引言 |
| 1 我国草莓病毒病的发生现状 |
| 2 侵染草莓的主要病毒分子变异和株系划分研究进展 |
| 2.1 草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV) |
| 2.2 草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMo V) |
| 2.3 草莓轻型黄边病毒(Strawberry mild yellow edge virus,SMYEV) |
| 2.4 草莓皱缩病毒(Strawberry crinkle virus,SCV) |
| 2.5 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV) |
| 3 小RNA深度测序技术在植物病毒学研究中的应用 |
| 4 实时荧光定量PCR技术在植物病毒学研究中的应用 |
| 5 本研究的目的及意义 |
| 第二章 基于小RNA深度测序技术鉴定侵染我国部分省市草莓种苗的病毒种类 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 主要试剂和仪器 |
| 1.3 方法 |
| 1.4 病毒检出率计算 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 小RNA深度测序检测结果 |
| 2.2 RT-PCR检测结果 |
| 2.3 草莓病毒病典型症状 |
| 2.4 不同产地草莓种苗感染病毒的情况 |
| 3 讨论 |
| 第三章 不同品种的草莓种苗病毒病调查与检测分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 草莓组织总RNA的提取和RT-PCR检测 |
| 1.3 序列测定和分析比较 |
| 1.4 病毒检出率计算 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 RT-PCR检测结果 |
| 2.2 草莓病毒病典型症状 |
| 2.3 不同品种的草莓种苗感染病毒情况 |
| 3 讨论 |
| 第四章 SMYEV辽宁分离物lnhy26 基因序列分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试材料 |
| 1.2 草莓组织总RNA的提取和RT-PCR检测 |
| 1.3 序列测定和拼接 |
| 1.4 序列分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 SMYEV辽宁分离物lnhy26 基因序列测定 |
| 2.2 基因序列同源性与系统进化树分析 |
| 2.3 基因序列重组分析 |
| 2.4 田间症状 |
| 3 讨论 |
| 第五章 实时荧光定量PCR检测SVBV和 SMo V的含量 |
| 1 材料及方法 |
| 1.1 供试材料 |
| 1.2 主要试剂和仪器 |
| 1.3 草莓组织总RNA的提取和反转录体系 |
| 1.4 重组质粒的稀释和拷贝数计算 |
| 1.5 实时荧光定量PCR检测 |
| 1.6 引物 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 SVBV和 SMo V重组质粒的浓度和纯度测定 |
| 2.2 标准曲线的建立 |
| 2.3 草莓叶片总RNA的浓度和纯度检测 |
| 2.4 草莓叶片中SVBV和 SMo V的实时荧光定量PCR检测结果 |
| 3 讨论 |
| 第六章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一 大豆黑斑病病原菌鉴定 |
| 作者简介 |
（4）草莓病毒病的发生及绿色防控（论文提纲范文）
| 1 主要病毒病原及发病症状 |
| 2 传播方式 |
| 2.1 主要病毒传播方式 |
| 2.2 其他病毒传播方式 |
| 3 草莓病毒的检测方法 |
| 4 绿色防控技术 |
| 4.1 培育无毒健康草莓苗 |
| 4.2 切断传播途径 |
（5）草莓病毒病、脱毒技术及病毒检测研究进展（论文提纲范文）
| 1 草莓主要病毒病类型 |
| 1.1 草莓斑驳病毒（strawberry mottle vi-rus,SMoV) |
| 1.2 草莓镶脉病毒（strawberry vein band virus,SVBV) |
| 1.3 草莓皱缩病毒（strawberry crinkle vi-rus,SCV) |
| 1.4 草莓潜环斑病毒（strawberry latent ringspot virus,SLRSV) |
| 1.5 草莓轻型黄边病毒（strawberry mild yellow edge virus,SMYEV) |
| 2 草莓脱毒技术 |
| 2.1 草莓茎尖培养脱毒 |
| 2.2 热处理脱病毒 |
| 2.3 化学试剂脱毒 |
| 2.4 热处理与茎尖培养相结合脱毒 |
| 2.5 超低温脱毒 |
| 3 草莓无病毒苗鉴定与繁殖 |
| 3.1 草莓病毒病检测方法 |
| 3.2 草莓脱毒苗繁育技术 |
| 4 展望 |
（6）草莓有害病毒种类与防治技术（论文提纲范文）
| 1 草莓病毒性病害种类 |
| 1.1 草莓斑驳病毒(SMoV) |
| 1.2 草莓镶脉病毒(SVBV) |
| 1.3 草莓轻型黄边病毒(SMYEV) |
| 1.4 草莓皱缩病毒(SCV) |
| 2 防治方法 |
| 2.1 建立高效灵敏的病毒检测技术 |
| 2.2 培育脱毒苗 |
| 2.3 控制传播介体 |
| 3 展望 |
（8）河南省草莓病毒病病原的鉴定及病毒cDNA克隆侵染体系的探索（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 草莓的价值 |
| 1.2 草莓病毒病的研究进展 |
| 1.2.1 草莓病毒病的发生特点与危害 |
| 1.2.2 草莓病毒病的种类 |
| 1.2.3 草莓主要病毒的生物特性 |
| 1.2.3.1 草莓斑驳病毒 |
| 1.2.3.2 草莓镶脉病毒 |
| 1.2.3.3 草莓轻型黄边病毒 |
| 1.2.3.4 草莓皱缩病毒 |
| 1.2.4 草莓病毒病的检测方法 |
| 1.2.4.1 指示植物接种鉴定法 |
| 1.2.4.2 血清学检测法 |
| 1.2.4.3 电镜鉴定法 |
| 1.2.4.4 分子生物学检测 |
| 1.2.5 草莓病毒病的防治 |
| 1.2.5.1 培养草莓无毒苗 |
| 1.2.5.2 建立幼苗脱毒体系 |
| 1.2.5.3 选育抗病品种 |
| 1.2.5.4 防治传播病毒介体 |
| 1.3 植物病毒接种方式 |
| 2 引言 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 供试植株 |
| 3.1.2 菌株与载体 |
| 3.1.3 试剂和仪器 |
| 3.1.4 常用培养基与溶液 |
| 3.1.5 引物 |
| 3.1.5.1 RT-PCR大田检测引物 |
| 3.1.5.2 cp阅读框扩增引物 |
| 3.1.5.3 SPaV全长基因组扩增引物 |
| 3.1.5.4 草莓病毒病多重PCR引物 |
| 3.1.5.5 SMoV与SMYEV侵染检测引物 |
| 3.1.5.6 SMoV与SMYEV的qRT-PCR检测引物 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 大田草莓病毒病的鉴定 |
| 3.2.1.1 大田草莓病叶的采集 |
| 3.2.1.2 草莓病叶总RNA的提取 |
| 3.2.1.3 RT-PCR扩增 |
| 3.2.1.4 qRT-PCR分析 |
| 3.2.1.5 PCR产物的回收与验证 |
| 3.2.1.6 载体与片段的连接 |
| 3.2.1.7 大肠杆菌感受态细胞DH5α的制备 |
| 3.2.1.8 连接产物的转化 |
| 3.2.1.9 菌落PCR验证及测序 |
| 3.2.1.10 测序结果的比对 |
| 3.2.2 多重PCR检测体系 |
| 3.2.3 病毒侵染体系的摸索 |
| 3.2.3.1 农杆菌感受态细胞GV3101的制备 |
| 3.2.3.2 农杆菌转化 |
| 3.2.3.3 农杆菌单菌落的验证 |
| 3.2.3.4 农杆菌浸润接种本生烟 |
| 3.2.3.5 摩擦接种 |
| 3.2.3.6 真空抽滤接种 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 草莓病毒病病原的鉴定及分析 |
| 4.1.1 草莓病毒病样品的采集 |
| 4.1.1.1 郑州市草莓病毒病病原的鉴定 |
| 4.1.1.2 新乡市草莓病毒病病原的鉴定 |
| 4.1.1.3 洛阳市草莓病毒病病原的鉴定 |
| 4.1.1.4 平顶山市草莓病毒病病原的鉴定 |
| 4.1.1.5 焦作市草莓病毒病病原的鉴定 |
| 4.1.2 草莓病毒病的复合侵染 |
| 4.1.3 SVBV与SNSVcp序列的遗传进化分析 |
| 4.1.3.1 SVBVcp序列的遗传进化分析 |
| 4.1.3.2 SNSVcp序列的遗传进化分析 |
| 4.1.4 SPaV全长基因组的扩增 |
| 4.1.5 多重RT-PCR检测体系的建立 |
| 4.2 CDNA克隆侵染体系的探索 |
| 4.2.1 SMoV侵染体系的探索 |
| 4.2.2 SMYEV侵染体系的探索 |
| 4.2.3 SMoV与SMYEV在本生烟中的侵染情况 |
| 5 结论与讨论 |
| 5.1 草莓病毒病的鉴定与分析 |
| 5.2 SMoV与SMYEV的cDNA克隆侵染体系的探索 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
（9）新疆地区四种草莓病毒病原的检测（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 引物设计 |
| 1.2.2 草莓总RNA提取和cDNA合成 |
| 1.2.3 草莓病毒病单一RT-PCR检测 |
| 1.2.4 三种病毒多重PCR体系建立 |
| 1.2.5 新疆草莓主栽区病毒病调查 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 草莓总RNA的提取和检测 |
| 2.2 单一RT-PCR检测草莓病毒病 |
| 2.3 多重RT-PCR检测草莓病毒病检测体系建立 |
| 2.4 多重RT-PCR检测 |
| 2.5 新疆草莓主栽区草莓病毒病检测 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（10）新疆草莓病毒病检测及脱毒繁育体系建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 草莓生产状况 |
| 1.1.1 我国草莓生产状况 |
| 1.1.2 新疆草莓生产状况 |
| 1.2 草莓脱毒研究状况 |
| 1.2.1 草莓常用病毒病检测方法 |
| 1.2.2 草莓常用的脱毒方法 |
| 1.2.3 草莓脱毒意义 |
| 第二章 新疆草莓主要病毒病分子检测及调查分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 供试材料 |
| 2.1.2 草莓总RNA提取和cDNA合成 |
| 2.1.3 草莓病毒病单一RT-PCR检测 |
| 2.1.4 三种病毒多重PCR体系建立 |
| 2.1.5 新疆草莓主栽区病毒病调查 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 草莓总RNA的提取和检测 |
| 2.2.2 单一RT-PCR检测草莓病毒病 |
| 2.2.3 多重RT-PCR检测草莓病毒病检测体系建立 |
| 2.2.4 多重RT-PCR检测结果 |
| 2.2.5 新疆草莓主栽区草莓病毒病检测结果 |
| 2.3 讨论与结论 |
| 第三章 新疆无病毒草莓快繁体系的建立 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 茎尖消毒及防褐化处理 |
| 3.1.3 初代培养6-BA浓度的筛选 |
| 3.1.4 初代培养与6-BA组合的最适激素筛选 |
| 3.1.5 继代培养6-BA浓度的筛选 |
| 3.1.6 继代培养与6-BA组合的最适激素筛选 |
| 3.1.7 生根培养 |
| 3.1.8 三个品种的脱毒效果检测 |
| 3.1.9 热处理与茎尖消毒及防褐化处理 |
| 3.1.10 三个品种的热处理结合茎尖组培脱毒效果检测 |
| 3.1.11 三个品种无病毒植株炼苗 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 ‘红颜’脱毒快繁 |
| 3.2.2 ‘甜查理’脱毒快繁 |
| 3.2.3 ‘京藏香’脱毒快繁 |
| 3.2.4 三个品种热处理和茎尖组培结合成活率 |
| 3.3 讨论与结论 |
| 3.3.1 三个品种初代培养讨论与结论 |
| 3.3.2 三个品种继代培养讨论与结论 |
| 3.3.3 三个品种生根培养讨论与结论 |
| 3.3.4 三个品种热处理结合茎尖组培讨论与结论 |
| 第四章 全文总结与展望 |
| 4.1 全文总结 |
| 4.1.1 RT-PCR检测体系 |
| 4.1.2 新疆草莓无病毒苗繁育体系建立 |
| 4.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师评阅表 |
四、草莓病毒病研究现状、脱毒技术及病毒鉴定研究进展（论文参考文献）
- [1]草莓病毒病及脱毒技术研究现状[J]. 陈晗,徐洪国,白婧,德青曲珍,钱立娟,祁宏英. 烟台果树, 2022(01)
- [2]草莓茎尖脱毒繁育体系研究进展[J]. 马秀明,缪军,王俊峰,韩伟,孙杨. 安徽农业科学, 2021(24)
- [3]我国部分省市草莓种苗病毒种类检测与序列分析[D]. 王佳. 北京农学院, 2021(08)
- [4]草莓病毒病的发生及绿色防控[J]. 夏冰. 中国植保导刊, 2021(04)
- [5]草莓病毒病、脱毒技术及病毒检测研究进展[J]. 霍辰思,樊新萍,刘伟. 果树资源学报, 2020(04)
- [6]草莓有害病毒种类与防治技术[J]. 杨涵,关统伟,徐红星,靳芙蓉,胡小朋. 现代农业科技, 2020(02)
- [7]草莓病毒病及其研究进展[J]. 苏代发,童江云,杨俊誉,陈杉艳,罗志伟,沈雪梅,赖泳红,Jamil Arslan,魏世杰,崔晓龙. 云南大学学报(自然科学版), 2019(06)
- [8]河南省草莓病毒病病原的鉴定及病毒cDNA克隆侵染体系的探索[D]. 韩晓玉. 河南农业大学, 2019(04)
- [9]新疆地区四种草莓病毒病原的检测[J]. 杨波,赵宝龙,郝小军,都业娟,何旺. 新疆农业科学, 2018(09)
- [10]新疆草莓病毒病检测及脱毒繁育体系建立[D]. 杨波. 石河子大学, 2018(12)