一、菊苣假单胞菌对有机磷农药乐果的降解作用初报(论文文献综述)
戈建珍[1](2021)在《果园农药对白三叶青贮品质及其微生物群落的影响》文中研究表明果园覆盖模式在全球广泛应用,果园覆盖植物对扩大饲料资源具有十分重要的意义,但农药残留很大程度上限制了其饲用价值。为探索科学、安全利用果园覆盖植物的方法,缓解我国饲料供应不足的问题,本文研究了果园农药对黄土高原苹果园最广泛种植的牧草白三叶(Trifolium repens)青贮品质及微生物的影响。首先通过将5种果园常用农药(毒死蜱、敌百虫、多菌灵、戊唑醇和高效氯氰菊酯)分别以低于推荐浓度(RU-)、推荐浓度(RU)、高于推荐浓度(RU+)喷施于白三叶表面,以喷水的白三叶为对照,在室温下青贮发酵60 d,研究果园覆盖植物白三叶青贮后5种果园农药的降解情况、农药浓度对其降解作用的影响以及5种农药对白三叶青贮品质及其营养价值的影响。然后,利用16S高通量测序技术对喷施多菌灵的白三叶青贮关键时期的微生物菌群动态变化情况进行研究。主要研究结果如下:(1)青贮后高效氯氰菊酯降解率最高,不同喷施浓度下降解率均大于99%,戊唑醇为72.5%-80.3%,敌百虫为71.1%-83.2%,多菌灵为59.6%-70.7%,毒死蜱为47.8%-64.8%。毒死蜱、敌百虫、多菌灵、戊唑醇喷施的浓度越高,其降解率越高。白三叶喷施毒死蜱、敌百虫、多菌灵后经青贮发酵,农药残留虽显着减少(P<0.05),但残留量仍高于欧洲食品安全局规定的作物类动物饲料中农药最大残留量;喷施不同浓度戊唑醇、高效氯氰菊酯的白三叶经发酵后农药残留均远低于安全标准。(2)与对照相比,各处理均增加了白三叶青贮发酵乳酸、乙酸、丙酸的产生,p H值降低。高效氯氰菊酯(3.3-3.6 mg/kg、0.9-1.1 mg/kg)、多菌灵(3.0-3.5 mg/kg、0.6-0.7mg/kg)、戊唑醇(3.3-3.5 mg/kg、0.8-0.9 mg/kg)、敌百虫(3.2-3.4 mg/kg、0.7-0.9 mg/kg)处理后青贮白三叶中乳酸、乙酸含量显着高于毒死蜱(2.4-3.0 mg/kg、0.4-0.6 mg/kg)处理(P<0.05),农药多菌灵、戊唑醇处理后,青贮白三叶中丙酸含量显着高于其他处理(P<0.05)。(3)与RU-浓度相比,喷施RU+浓度毒死蜱的青贮白三叶中,乳酸含量显着减少(P<0.05),乙酸、丙酸含量显着增加,p H值显着减小(P<0.05);RU+浓度敌百虫处理的青贮白三叶中乳酸、乙酸含量减少,丙酸含量增加,p H值增大;RU+浓度多菌灵处理的青贮白三叶中乳酸、乙酸、丙酸含量均显着增加(P<0.05),p H值无显着变化;RU+浓度戊唑醇处理的青贮白三叶中,乳酸、乙酸和丙酸含量显着降低(P<0.05),p H值无显着变化;RU+浓度高效氯氰菊酯处理的青贮白三叶中,乳酸、丙酸含量和p H值均无显着变化。(4)添加农药后青贮对白三叶的干物质(DM)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、氨态氮的含量影响显着(P<0.05),对粗纤维(CF)、酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)无显着影响。(5)喷施多菌灵后显着改变了白三叶青贮细菌的群落构成(P<0.05),多菌灵喷施促进了青贮的菌群丰度、多样性的增加;随着时间的推移,多菌灵降解,菌群丰度先增加后减少、菌群多样性持续增加。随着青贮时间的推移,多菌灵逐渐降解,寡养单胞菌属、肠杆菌属、芽孢杆菌属等具有降解多菌灵功能的菌群丰度减少。综上所述,具高效氯氰菊酯、戊唑醇的白三叶青贮后,农药残留达到安全饲用标准;不同性质的5种果园农药对青贮白三叶营养价值无负面影响,研究结果可为具有农药残留的白三叶青贮饲料的饲用安全性和果园覆盖植物资源的开发利用提供理论依据。
陈艺文,陈成聪,庄明珠,金珊[2](2020)在《茶叶农残降解研究进展》文中认为农药在茶树病虫害的防控中发挥重要作用,但是农药大量、无节制的使用可能带来茶叶食品安全问题,并造成环境污染。本文综述了近年来茶叶农药残留降解技术的相关研究,按照茶叶生产顺序,从鲜叶、加工、成品茶到贮存时的农药残留降解进程与相关的农残降解方法进行分析与探讨,以期为提高茶叶品质、保障生产和消费安全提供参考。
张亚亚[3](2019)在《有机磷农药降解菌的筛选及菌剂的制备》文中研究表明农民通常以喷洒农药的方式防治作物中病虫害。然而,随着农药的广泛使用,危害也与日俱增。微生物菌剂因具有高效、低成本、无污染、无副作用等优点,不仅能提高作物产量,同时也可降解农药残留,已成为农业绿色发展不可或缺的产品。本文旨在筛选出微生物,测定其对敌敌畏的降解性能,通过16S r DNA法对优势降解菌进行鉴定,选出枯草芽孢杆菌、纤维化纤维微细菌、热带芽孢杆菌进行后续拮抗性和生长特性试验,最后通过响应面法优化确定三株菌的配比为4:2:3时对有机磷农药敌敌畏的降解率最高,达到60%,降低了环境中农药残留量的同时也为敌敌畏的降解提供了菌种资源,对整个生态系统的修复具有重要意义。1、本研究以实验室原有菌种枯草芽孢杆菌(S-3)、自然腐败变质的食物及长期受有机磷农药污染的土壤为菌种来源,分离、筛选得到18株菌,将这些菌依次接种到含有敌敌畏浓度为100500mg/L的无机盐培养基中驯化培养,筛选出在无机盐培养基中生长良好、传代稳定的菌种,然后通过镜检及形态观察初步判断菌种类型,利用气相色谱法测定菌种对敌敌畏的降解性能。结果表明,经过10h后,编号为E-1、S-3、Z-7、H-9的菌种对敌敌畏的降解效果较好,分别为32.88%、31.03%、37.82%和33.72%。由于菌种S-3枯草芽孢杆菌来源于实验室,因此只对其它三株菌进行鉴定,通过16S r DNA鉴定结果表明:E-1、Z-7、H-9分别为铜绿假单胞菌、纤维化纤维微细菌、热带芽孢杆菌,由于铜绿假单胞菌是条件致病菌,实际使用时会对周围环境造成污染,因此,选用另外三株菌进行后续试验的研究。2、通过枯草芽孢杆菌、纤维化纤维微细菌、热带芽孢杆菌的拮抗性试验,结果表明三株菌两两之间互不拮抗,能够复合培养。研究各菌种生长特性发现,枯草芽孢杆菌在pH为6,温度30℃,接种量为4%,碳源为牛肉膏时生长量达到最大;纤维化纤维微细菌在pH为6,温度为37℃,接种量为2%,碳源为葡萄糖时生长量最大;热带芽孢杆菌在pH为5,温度为30℃,接种量3%,碳源为牛肉膏时生长量最大。三株菌的最佳氮源均为酵母膏。最后通过响应面试验确定,当三株菌的最优配比为4:2:3时,复合菌剂的生长量达到最大,且对敌敌畏的降解率可达60%。
杨贞妮,郭旋,钟近艺,辛瑜,李由然,石贵阳,张梁[4](2019)在《重组枯草芽孢杆菌分泌表达缺陷假单胞菌磷酸三酯酶及其发酵优化》文中提出磷酸三酯酶(phosphotriesterase, PTE, EC3.1.8.1)能够水解有机磷化合物,但其应用一直受限于酶表达量低的问题.为了获得高效表达的有机磷水解酶,本文构建了PTE基因来源于缺陷假单胞菌(Pseudomonas diminuta)的重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600),并采用单因素实验和正交实验对培养基进行优化,确定了重组菌产酶的最佳发酵条件,同时检测重组酶对有机磷类化合物的降解作用.结果表明,最优的培养基组成为蔗糖(40 g/L)、酵母膏(40 g/L)、蛋白胨(20 g/L)、磷酸氢二钾(2 g/L)、硫酸锰(1 g/L)、硫酸镁(6 g/L).经测定,该酶4 h内对(5 mg/mL的甲基对硫磷、乐果以及神经毒剂模拟剂甲基磷酸二甲酯(dimethyl methyl phosphonate, DMMP)的降解率分别达到98%, 92%, 73%,且DMMP在12 h内也完全降解.本文实现了PTE的胞外分泌表达,为研制有机磷化合物的酶基消毒剂提供了技术支持.
汪娅黎[5](2016)在《浙江笋用竹林土壤农药污染特征及毒死蜱降解技术研究》文中指出竹笋素有“寒土山珍”之称,是最受追捧的纯天然绿色健康食品之一,也是我国传统大宗出口的重要农产品之一。目前,笋产业已成为我国林业产业的重要组成部分和区域社会经济发展的重要支柱。然而,随着人们对笋用竹林经营强度的不断提高,尤其是冬笋覆盖等高强度农业经营措施的广泛应用,竹笋病虫害日趋严重。为防治竹笋病虫害,上个世纪八九十年代,高毒速效化学农药被广泛使用,造成了严重的竹林土壤农药污染,并引起竹笋农药残留超标等食品安全问题。本研究以浙江省主要笋用雷竹林为研究对象,通过取样检测分析笋用雷竹林土壤农药污染的现状,并与笋用竹林土壤农药污染的历史资料进行对比,分析浙江省主要雷竹笋产区土壤农药污染的变化趋势;根据土壤取样分析结果,选择农药残留污染最重的毒死蜱为耙标,采用微生物降解和碱性物质降解这两种手段,研究笋用竹林土壤毒死蜱污染治理技术。研究结果如下:(1)在德清、临安、富阳、龙游、缙云和庆元六个主要笋产区共采集土壤样品349份,检测到13种有机农药残留,分别为α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH、p,p’-DDT、p,p’-DDE、五氯硝基苯、百菌清、三氯杀螨醇、毒死蜱、乐果、氯氰菊酯和氰戊菊酯;在所有检出的农药种类中,毒死蜱的检出率最高,其最高残留量为200.00 ng/g;与2003-2004年的历史检测资料相比,农药污染的种类少了9种,检出率和浓度均有所降低,表明浙江省雷竹笋用林土壤农药残留污染水平呈明显的下降趋势。(2)有机材料覆盖、土壤酸碱度、竹林土壤的历史背景和新土覆盖等经营管理措施对土壤农药残留有显着的影响,是决定污染水平的主要因素。(3)室内降解试验结果表明,不动杆菌Acinetobacter sp.、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus和铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa在20 d内对毒死蜱的降解率分别为89.46±4.72%、83.07±5.83%和75.59±1.14%,无菌对照组对毒死蜱的降解率为59.33±4.39%,三种菌与对照间差异显着(F=26.323,df=3;P=0.0002);石灰能有效促进毒死蜱的降解,在0.006 g/L的石灰浓度条件下,20 d内毒死蜱的降解率为72.58±5.41%,显着高于对照组的40.35±7.07%(F=38.873,df=1,P=0.0034)。(4)野外试验研究结果表明,石灰和碱性肥料石灰氮都能够有效地促进毒死蜱的降解。将石灰按照85、135、185和235 g/m2剂量均匀施于土壤,毒死蜱的半衰期分别为:12.38 d,8.25 d,6.73 d和10.35 d,而对照组毒死蜱的半衰期为19.80d;将石灰氮按照60、90和120 g/m2剂量均匀施于土壤,毒死蜱的半衰期分别为:16.12 d,11.75 d和11.00 d;碱性物质处理的毒死蜱半衰期均比对照组有所缩短。(5)将蜡样芽孢杆菌和不动杆菌的菌悬液(菌体密度均为108个/m L)按照50ml/m2剂量喷洒于野外竹林土壤,63天后毒死蜱的降解率达到93.38±0.55%和94.69±0.92%,半衰期分别为17.77 d和15.75 d,空白对照的降解率为90.45±1.54%,半衰期为19.8 d,表明蜡样芽孢杆菌和不动杆菌在野外也能够在一定程度上促进毒死蜱的降解,但差异并不显着(F=4.959,df=2,P=0.054)。(6)根据上述研究结果,结合冬笋覆盖等高强度经营引起的竹林土壤酸化问题,我们建议在冬笋覆盖之前按照185 g/m2浓度施用石灰或者90 g/m2浓度施用石灰氮碱性肥料,可以有效修复毒死蜱在笋用竹林中的残留污染。
冯推紫[6](2015)在《沼泽红假单胞菌PSB06抗植物病毒蛋白Rhp-PSP的基因克隆与原核表达》文中认为烟草花叶病毒TMV是重要的农作物病害的病原物,危害农作物并造成巨大的经济损失。近年来,由于化学防治经济作物病害会造成对人体的危害和重大的环境污染,人们倡导使用无公害产品防治农作物病害。蛋白农药是一种新型的生物农药,对人畜无害,环境友好,既能提高农产品附加值,又能增加经济收益,具有广阔的市场前景和良好的市场竞争力。光合细菌PSB是可以应用于农业作为有机肥、降解农药残留等的一种有益菌,我们发现其有抗辣椒病毒病效果,但其作用机制却未见报道。本研究首次发现光合细菌PSB06菌液中含有可以抑制TMV活性的蛋白成分高氯酸溶性酶PSP,并命名为Rhp-PSP。高氯酸溶性酶PSP是一种核糖核酸内切酶,在无细胞翻译体系中能抑制蛋白合成,根据报道,PSP大多数都是在动物中被发现,而在微生物中鲜有被报道。为了进一步阐述Rhp-PSP与TMV互作过程中的分子机制,需要大量获取重组蛋白。本论文的目的是采用原核表达技术,进行蛋白基因的克隆分析,大量制备Rhp-PSP蛋白,为下一步抗病机理的研究奠定基础。研究结果如下:(1)通过活化光合细菌PSB06菌株,提取PSB06菌株总DNA,进行16S rDNA片段的PCR扩增及测序,结果表明试验菌株为PSB06菌株;(2)通过设计筛选特异性高的PSP引物,PCR扩增获得Rhp-PSP全长片段基因,插入T5载体中进行连接转化,测序分析结果确定了目的片段Rhp-PSP序列的完整性和准确性;(3)将目的基因Rhp-PSP插入E1表达载体中,在Rosetta感受态细胞中转化,加IPTG诱导表达目的蛋白,进行SDS-PAGE电泳检测,结果表明目的基因Rhp-PSP表达成功。
彭云,欧阳进,鲁耀,刘智强[7](2015)在《烟叶农残管控措施研究综述》文中进行了进一步梳理烟草病虫害的发生是影响我国烟叶产质量的主要因素之一,目前烟草病虫害的防治主要以施用各种化学农药为主,长期、大量施用化学农药易造成土壤、灌溉水和烟叶中农残超标的问题;烟草作为吸食品,随着吸烟与健康问题越来越受到人们的关注,烟叶及卷烟产品农药残留问题已经引起世界各国的重视,而解决烟草农药残留也成为烟草行业工作中的重点。由此,笔者从烟叶及卷烟产品农残最高限量标准、烟叶农药残留来源及影响因素、烟叶农药残留量及消解速度、烟叶农残向卷烟烟气的转移及从技术、管理和思想意识三个层面的烟叶农残管控措施进行综述,为解决烟草中农残问题提供理论依据和技术支持。
赵杰宏[8](2009)在《有机磷水解酶基因OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究》文中研究指明化学农药给农业生产带来巨大经济效益的同时,由于施用不当或滥用农药也给环境造成多种污染,其中使用量最大、毒性较高的有机磷类杀虫剂和除草剂尤其如此。基于这种现状,本研究试图利用微生物源有机磷农药水解酶OPH的编码基因OPD,构建组成性表达载体和果实特异性表达载体,分别遗传转化番茄和黄瓜,通过基因工程提高它们降解有机磷农药残留的能力,以减少番茄和黄瓜中农药残留给人们的健康造成不良影响。获得如下研究结果。(1)表达载体构建与番茄瞬时表达分析构建了CaMV 35S驱动OPD的表达载体pSOP。克隆番茄果实特异性启动子E8,构建了E8驱动OPD的表达载体pSE8OP。在番茄果实中进行瞬时表达分析,证明OPD基因能够在番茄果实中获得表达。利用全波长扫描和荧光检测,亦证明番茄瞬时表达的OPH具有水解有机磷农药蝇毒磷的活性,最大酶活约11.59U/mg可溶性蛋白。建立的番茄瞬时表达系统,可以在1周左右快速有效地检测基因表达能力。(2)转基因黄瓜表达有机磷农药水解酶分析优选出津研4号黄瓜(Cucumis sativus L.Jinyan 4)的再生和转化条件。通过农杆菌介导,把35S-OPD表达元件转化到津研4号黄瓜中,筛选出9株Kan抗性转化苗,检测其中3株GUS阳性转化苗的叶片对有机磷农药蝇毒磷的降解能力,其中c-2株系的活性最高,酶活达到7.82μmol/mg·min,c-1株系的酶活为5.6μmol/mg·min,c-3株系的酶活为3.8μmnol/mg·min。首次通过表达有机磷农药水解酶OPH,提高了黄瓜降解有机磷农药的能力。(3)转基因番茄表达有机磷农药水解酶分析优选出Micro-Tom番茄(Solanum lycopersicum cv.Micro-Tom)的再生和转化条件。分别把35S-OPD和E8-OPD表达元件转化到Micro-Tom番茄中。通过GUS染色、PCR检测和Southern blotting分析,证明OPD基因已整合进转基因植株基因组中,具有1个拷贝。通过RT-PCR分析发现,E8驱动OPD基因在番茄果实中获得表达,但在叶片中未能检测到OPD基因的表达。通过检测不同时期果实中有机磷农药水解酶的活性,发现番茄在幼果期就表现出水解蝇毒磷活性,酶活达到43.8±4.5μmol/mg·min;青果期酶活是非转基因番茄的3倍以上,达到46.6±5.7μmol/mg·min;破色期酶活是非转基因番茄的12倍以上,达到101.0±4.3μmol/mg·min。转基因番茄OPH酶降解蝇毒磷的Vmax为2.73μmol/mg·min,Km为4.04μmol/L。比较转基因番茄和非转基因番茄对蝇毒磷的降解能力,结果表明非转基因番茄对蝇毒磷有很低的酶活性,转基因番茄通过表达有机磷农药水解酶OPH提高了对蝇毒磷的降解能力。首次通过在番茄果实中特异性表达OPH,提高了果实降解有机磷农药的能力,同时也不足以降低叶子上喷施农药的药效。(4)重组OPH酶性质分析转基因番茄重组表达OPH的最适反应温度为30℃,最适pH为9.0,温度稳定性高,70℃时仍保留54%的酶活;在Co2+存在时酶活最高,是天然Zn2+条件下酶活的2倍以上;易受到螯合剂EDTA和还原剂SDS、β-ME、TritonX-100和DTT的抑制;果实特异性表达OPH使番茄降解对硫磷的能力提高了2倍以上,降解毒死蜱能力提高了3-7倍,对乐果降解影响不明显。HPLC分析20μg/ml对硫磷或毒死蜱中浸泡24h后番茄的农药残留,结果表明转基因番茄叶子和果实中的对硫磷残留比非转基因番茄的分别少8.1%和40.0%,转基因番茄果实中毒死蜱残留比非转基因番茄的少40.6%,转基因番茄能显着提高有机磷农药残留的降解能力,并且具有果实特异性。重组OPH降解对硫磷的Vmax为1.17μxmol/mg·min,Km为11.15μmol/L;降解毒死蜱的Vmax为8.80μmol/mg·min,Km为5.91μmol/L。表现出与微生物源OPH不同的特征,可能与OPH翻译后修饰和定位有关。OPH翻译后有8个丝氨酸、6个苏氨酸和2个酪氨酸分别被磷酸化。这三种氨基酸往往是酶的活性中心,其磷酸化修饰会从结构到功能上影响OPH的活性和代谢模式。(5)OPH、GUS和NptⅡ潜在致敏性的生物信息学评估首次按照FAO/WHO决策方案和Codex指标,使用3大过敏原预测网站的现存数据和预测算法,对OPH、GUS和NptⅡ的潜在食品致敏性进行评估。在线Blast或Fasta比对分析发现,OPH、GUS和NptⅡ的全序列匹配性和连续80aa匹配性皆不存在致敏性可能。连续6aa匹配中,OPH有2个片段与大豆、小麦和橡胶树前纤维蛋白,以及德国蟑螂过敏原相关蛋白存在序列一致;GUS有1个片段与埃及伊蚊唾液腺过敏原存在序列一致;NptⅡ有1个片段与摇蚊血红蛋白过敏原存在序列一致,但匹配的6aa序列皆不在各蛋白抗原性决定部位。初步说明用于转基因植物表达的OPH、GUS和NptⅡ不具有潜在的致敏性风险。(6)降解有机磷乐果菌株的分离与鉴定经梯度富集和驯化,从贵阳花溪的农田土壤中,分离、筛选出两株具有降解有机磷农药乐果的真菌菌株F1和F2。比较分析发现,F1菌株降解乐果能力显着比F2菌株高,但是耐受性不如F2菌株。进一步分析三种碳源对F1菌株降解能力的影响,发现F1菌株在BM培养液中,能够快速降解100mg/L乐果,但是补充的碳源会延迟菌株对乐果的降解。经形态观察和rDNA ITS序列分析,证明F1菌株属于镰刀菌属(Fusarium sp.)。首次从贵州农田土壤中筛选出降解乐果的镰刀菌Fusarium sp.F1,为开发新颖的农药降解酶和降解基因用于进一步转基因植物培育奠定了基础。
黄雅[9](2009)在《微生物对有机磷农药乐果在水—气界面挥发与降解的研究》文中进行了进一步梳理近年来,由于害虫抗药性的增强,使用农药的浓度和次数不断增加,滥用和乱用高毒、高残留农药的现象屡禁不止,大量残留在蔬菜上的农药会对人体产生直接毒害,在人体内产生积累和富集,直接影响到人类的健康。利用新分离的蜡状芽孢杆菌和购买的铜绿假单胞菌,采用固相萃取-气相色谱法对有机磷农药乐果进行相应的检测,研究有机磷农药乐果在受试微生物和受试条件下的水解、微生物降解和挥发的规律,建立了乐果的水解动力学方程和在水-气界面的挥发动力学方程。乐果的水解试验结果表明乐果的水解速率受pH值和温度影响显着。pH为5的酸性条件,乐果相对稳定,随着pH值的增大,乐果水解速率明显增大。pH值升高两个单位,乐果水解反应速率平均增大了12倍。乐果的水解速率随温度升高而加快,温度每升高10℃,乐果的水解速率常数增大为原来的2倍。从长期施用乐果的土壤中分离出一株高效降解有机磷农药乐果的细菌,通过形态特征、生理生化、脂肪酸细菌鉴定系统和16s rDNA测序对其鉴定为蜡状芽孢杆菌(GB-1)。GB-1比文献报道活跃的铜绿假单胞菌(P.a)对乐果具有更好的降解效果,120h时菌株P.a对乐果的降解率为71.6%,菌株GB-1对乐果的降解率为88.9%。温度变化对菌株的生长和降解率影响显着。菌株GB-1和P.a能够适应的温度范围较广,在pH5.09.0与1742℃均能生长并有效降解乐果,在中性条件下的生长优于酸性和碱性条件,最佳降解温度为32℃。在不同菌剂量的条件下,菌株GB-1和P.a对乐果降解率随菌剂量的增加而提高,当菌剂量增大到4%时,降解率增加的趋势将变缓。乐果在水-气界面的挥发速率随着温度的升高、气流速度的增大呈现增快的趋势。温度每升高10℃,乐果的挥发速率常数约增大为原来的1.5倍。气流速度从40L/h增大到160h/L,挥发速率增大了2.8倍。通过对乐果的水解、微生物降解和挥发规律的研究,分别建立了乐果水解动力学方程和乐果在水-气界面的挥发动力学方程,均符合一级动力学方程。
黄雅,李政一,赵博生[10](2009)在《有机磷农药乐果降解的研究现状与进展》文中指出有机磷农药一方面能有效防治农林病虫害,造福于人类,另一方面也给人类赖于生存的环境带来危害。有机磷农药在环境中的降解性能,是评价有机磷农药对环境危害影响的重要指标,有机磷农药在环境中的残留时间越长,对环境的污染及其对各种环境生物,甚至对人类的危害也越大。有机磷农药在环境中的降解,包括微生物降解、光化学降解、化学氧化降解和超声波降解。不同的降解方式,由于影响因素和相关机理的不同,各种降解特性存在着一定的差异。
二、菊苣假单胞菌对有机磷农药乐果的降解作用初报(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、菊苣假单胞菌对有机磷农药乐果的降解作用初报(论文提纲范文)
(1)果园农药对白三叶青贮品质及其微生物群落的影响(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 果园覆盖植物的研究 |
1.1.1 果园覆盖植物的发展概况 |
1.1.2 果园覆盖植物对果园的作用 |
1.1.3 果园覆盖植物的综合利用 |
1.1.4 白三叶作为果园覆盖植物的特点及价值 |
1.2 果园生产中农药残留研究 |
1.2.1 果园中常用农药残留研究 |
1.2.2 果园饲用植物农药残留的研究 |
1.3 农药残留降解研究 |
1.4 青贮技术研究 |
1.4.1 青贮概念及原理 |
1.4.2 青贮方法、品质鉴定指标 |
1.4.3 青贮微生物的研究进展 |
1.5 选题目的与意义 |
1.6 研究内容 |
1.7 技术路线 |
第二章 白三叶青贮对不同初始浓度5 种残留农药降解影响 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验设计 |
2.1.3 样品采集 |
2.1.4 农药残留测定 |
2.1.5 数据处理 |
2.2 结果与分析 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 不同浓度5 种农药对白三叶青贮饲料品质的影响 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验设计 |
3.1.3 样品采集 |
3.1.4 测定指标与方法 |
3.1.5 数据处理 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 不同初始浓度5 种农药对白三叶青贮饲料品质的影响 |
3.2.2 不同初始浓度5 种农药对白三叶青贮饲料营养价值的影响 |
3.3 讨论 |
3.3.1 不同初始浓度5 种农药对白三叶青贮饲料品质的影响 |
3.3.2 不同初始浓度5 种农药对白三叶青贮饲料营养价值的影响 |
3.4 小结 |
第四章 多菌灵农药对白三叶青贮微生物细菌群落的影响 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 试验材料 |
4.1.2 试验设计 |
4.1.3 样品采集 |
4.1.4 测定指标与方法 |
4.1.5 数据处理 |
4.2 结果分析 |
4.2.1 青贮微生物群落结构多样性分析 |
4.2.2 微生物群落α多样性分析 |
4.2.3 喷施多菌灵的白三叶青贮发酵过程中菌群结构分析 |
4.3 讨论 |
4.4 小结 |
第五章 结论与展望 |
5.1 结论 |
5.2 创新点 |
5.3 研究展望 |
参考文献 |
附录A |
致谢 |
个人简历 |
(2)茶叶农残降解研究进展(论文提纲范文)
1 茶鲜叶中农药残留的降解 |
1.1 自然条件下农药残留的降解 |
1.2 农艺措施干预下农药残留的降解 |
1.3 臭氧-光催化法降解农药残留 |
1.4 生物技术降解农药残留 |
2 加工过程对农药残留的降解 |
2.1 高温杀青 |
2.2 普洱茶固态发酵 |
3 成品茶中农药残留的降解 |
4 贮藏过程中农药残留的降解 |
5 问题与展望 |
(3)有机磷农药降解菌的筛选及菌剂的制备(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 前言 |
1.1 本论文主要研究内容 |
1.1.1 研究意义 |
1.1.2 研究内容 |
1.1.3 技术路线 |
1.2 农药残留概述 |
1.2.1 农残产生的原因 |
1.2.2 农药残留的危害 |
1.2.3 农药残留的控制与修复 |
1.3 微生物修复概述 |
1.3.1 微生物菌剂的概念 |
1.3.2 微生物菌剂的分类 |
1.3.3 国外发展状况 |
1.3.4 国内发展状况 |
1.3.5 微生物修复在农业中的应用 |
第二章 敌敌畏降解菌的分离、筛选及鉴定 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 菌种来源 |
2.1.2 培养基 |
2.1.3 化学试剂 |
2.1.4 仪器 |
2.1.5 敌敌畏标准母液及工作液的配制 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 菌种的分离纯化 |
2.2.2 微生物的驯化 |
2.2.3 镜检观察 |
2.2.4 菌株降解能力的测定 |
2.2.5 降解菌的分子鉴定 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 菌株的分离筛选 |
2.3.2 镜检结果 |
2.3.3 菌株降解能力结果 |
2.3.4 菌株的鉴定 |
2.4 本章小结 |
第三章 具有敌敌畏降解能力的复合菌剂的制备 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 供试菌种 |
3.1.2 试剂、仪器 |
3.1.3 培养基 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 菌种拮抗性试验 |
3.2.2 液体种子液的培养 |
3.2.3 菌株培养条件的优化 |
3.2.4 响应面优化设计 |
3.2.5 复合菌剂的制备及降解敌敌畏的测定 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 拮抗性试验结果 |
3.3.2 菌种生长特性的研究 |
3.3.3 响应面结果及数据分析 |
3.3.4 复合菌剂的制备及降解敌敌畏的测定 |
3.4 本章小结 |
第四章 结论与讨论 |
4.1 结论 |
4.2 讨论 |
4.3 论文创新点 |
4.4 不足与展望 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
(4)重组枯草芽孢杆菌分泌表达缺陷假单胞菌磷酸三酯酶及其发酵优化(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 重组枯草芽孢杆菌表达载体的构建 |
1.3 有机磷水解酶的筛选 |
1.4 酶活力的测定 |
1.5 重组酶的纯化分析 |
1.6 重组蛋白的SDS-PAGE分析 |
1.7 培养基优化 |
1.8 重组酶对有机磷化合物降解率的测定 |
2 结果和分析 |
2.1 有机磷水解酶的筛选 |
2.2 磷酸三酯酶基因在B.subtilis WB600中的表达 |
2.3 摇瓶培养基的优化 |
2.4 重组菌株培养基优化验证实验结果 |
2.5 重组酶对有机磷化合物降解率的测定 |
3 讨论 |
(5)浙江笋用竹林土壤农药污染特征及毒死蜱降解技术研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 我国农业土壤污染现状 |
1.1.1 我国农药使用现状 |
1.1.2 中国农业土壤农药残留污染现状 |
1.1.2.1 有机氯类农药 |
1.1.2.2 有机磷类农药 |
1.1.2.3 拟除虫菊酯类农药 |
1.2 我国竹林土壤污染现状 |
1.2.1 竹产业的快速发展与病虫灾害的发生 |
1.2.2 笋用竹林土壤污染现状 |
1.3 农业土壤农药污染的修复 |
1.3.1 物理/化学修复技术 |
1.3.1.1 换土法 |
1.3.1.2 热修复法 |
1.3.1.3 土壤淋洗技术 |
1.3.1.4 光化学降解法 |
1.3.1.5 化学可渗活性栅(PRB)技术 |
1.3.2 生物修复技术 |
1.3.2.1 动物修复技术 |
1.3.2.2 植物修复技术 |
1.3.2.3 微生物修复技术 |
1.3.3 联合修复技术 |
1.3.3.1 生态化学修复法 |
1.3.3.2 淋洗与微生物联合修复法 |
1.3.3.3 翻耕与微生物联合修复法 |
1.4 本课题的研究目的和意义 |
第二章 浙江省竹林土壤有机农药污染特征与影响因子研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 样点设置与取样 |
2.1.2 土壤中有机磷、有机氯和拟除虫菊酯类农药残留提取 |
2.1.3 农药残留气相色谱测定 |
2.1.4 农药残留回收率测定 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 竹林土壤有机农药残留分析 |
2.2.2 有机材料覆盖对竹林土壤农药残留量的影响 |
2.2.3 石灰对竹林土壤农药残留的影响 |
2.2.4 竹林土壤背景对农药残留的影响 |
2.2.5 新土覆盖对竹林土壤农药残留的影响 |
2.3 结论与讨论 |
第三章 竹林土壤毒死蜱的降解研究 |
3.1 微生物对毒死蜱的降解研究 |
3.1.1 材料与方法 |
3.1.1.1 供试菌种 |
3.1.1.2 试剂和仪器 |
3.1.1.3 液体环境中毒死蜱的提取及液相色谱分析 |
3.1.1.4 土壤中毒死蜱的提取及气相色谱分析 |
3.1.1.5 微生物法室内降解试验 |
3.1.1.6 野外降解试验 |
3.1.2 结果与分析 |
3.1.2.1.毒死蜱的添加回收率 |
3.1.2.2 微生物室内降解试验结果 |
3.1.2.3 微生物野外降解试验结果 |
3.2 碱性物质对毒死蜱的降解研究 |
3.2.1 材料与方法 |
3.2.1.1 试剂和仪器 |
3.2.1.2 毒死蜱残留的测定方法 |
3.2.1.3 石灰对毒死蜱的室内降解试验 |
3.2.1.4 碱性物质对毒死蜱降解的野外试验 |
3.2.2 结果与分析 |
3.2.2.1 石灰对毒死蜱的室内降解试验结果 |
3.2.2.2 碱性物质对毒死蜱降解的野外试验结果 |
3.3 结论与讨论 |
第四章 结论与展望 |
4.1 结论 |
4.2 展望 |
参考文献 |
作者简介 |
致谢 |
(6)沼泽红假单胞菌PSB06抗植物病毒蛋白Rhp-PSP的基因克隆与原核表达(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 烟草花叶病毒 |
1.1.1 TMV的生物学特性 |
1.1.2 TMV的防治 |
1.2 光合细菌 |
1.2.1 光合细菌生物学特性 |
1.2.2 光合细菌的应用 |
1.3 高氯酸溶性蛋白PSP的研究 |
1.4 研究的意义 |
第二章 Rhp-PSP基因的克隆与表达 |
2.1 材料 |
2.1.1 供试材料 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 菌种活化培养 |
2.2.2 CTAB法提取菌液总DNA |
2.2.3 菌株16S rDNA序列的PCR扩增 |
2.2.4 PCR产物1%琼脂糖凝胶电泳检测 |
2.2.5 PCR产物的纯化回收 |
2.2.6 菌株DNA测序 |
2.2.7 DNA与T5载体的连接转化 |
2.2.8 Rhp-PSP的诱导表达 |
2.2.9 质粒的提取 |
2.2.10 目的基因的表达 |
2.2.11 蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
2.2.12 重组蛋白与原蛋白的活性测定 |
2.3 结果分析 |
2.3.1 光合细菌PSB06菌液总DNA的提取 |
2.3.2 16S rDNA扩增的凝胶电泳检测分析 |
2.3.3 16S rDNA回收的电泳检测分析 |
2.3.4 Rhp-PSP序列的查找 |
2.3.5 Rhp-PSP序列的电泳检测分析 |
2.3.6 Rhp-PSP序列回收纯化的电泳检测分析 |
2.3.7 Rhp-PSP与T5载体的连接转化 |
2.3.8 Rhp-PSP序列与El载体的连接转化 |
2.3.9 Rhp-PSP的诱导表达 |
2.3.10 目的蛋白的活性测定 |
2.3.11 目的蛋白的质谱分析 |
2.4 讨论 |
2.5 结论 |
参考文献 |
附录1 试剂及培养基配制方法 |
附录2 常用试剂及仪器 |
致谢 |
(8)有机磷水解酶基因OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究(论文提纲范文)
缩略词列表 |
中文摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 农药残留现状 |
1.1.1 水土农药残留 |
1.1.2 果蔬农药残留 |
1.1.3 中药材农药残留 |
1.1.4 茶叶农药残留 |
1.1.5 烟草农药残留 |
1.1.6 农药残留对人类的危害 |
1.2 农药残留降解资源 |
1.2.1 农药降解微生物 |
1.2.2 真菌降解酶 |
1.2.3 细菌降解酶和降解基因 |
1.3 有机磷农药水解酶OPH的研究进展 |
1.3.1 OPH酶促降解机理 |
1.3.2 OPH的重组表达和定向改造 |
1.3.3 OPH在监测环境农残上的应用 |
1.3.4 展望 |
1.4 农药残留的植物修复 |
1.4.1 植物直接吸收并降解农药 |
1.4.2 植物根际与微生物的协同降解 |
1.4.3 植物修复技术的展望 |
1.5 立题思路 |
第二章 有机磷水解酶基因OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究 |
第一节 表达载体构建与番茄瞬时表达研究 |
2.1.1 材料与方法 |
2.1.1.1 材料 |
2.1.1.2 方法 |
2.1.2 结果与分析 |
2.1.2.1 E8启动子的克隆 |
2.1.2.2 OPD表达载体的构建 |
2.1.2.3 瞬时转化番茄的GUS染色 |
2.1.2.4 瞬时表达OPH酶活分析 |
2.1.2.5 瞬时转化番茄的RT-PCR检测 |
2.1.3 讨论 |
第二节 转基因番茄、黄瓜表达OPH研究 |
2.2.1 材料与方法 |
2.2.1.1 材料 |
2.2.1.2 方法 |
2.2.2 结果与分析 |
2.2.2.1 黄瓜再生体系 |
2.2.2.2 转基因黄瓜GUS染色与PCR检测 |
2.2.2.3 转基因黄瓜OPH酶活分析 |
2.2.2.4 番茄再生体系 |
2.2.2.5 转基因番茄GUS染色和PCR检测 |
2.2.2.6 转基因番茄Southern bloting检测 |
2.2.2.7 转基因番茄RT-PCR检测 |
2.2.2.8 转基因番茄OPH酶活分析 |
2.2.2.9 OPH降解蝇毒磷反应曲线 |
2.2.3 讨论 |
第三节 重组表达OPH酶的理化特征分析 |
2.3.1 材料与方法 |
2.3.1.1 材料 |
2.3.1.2 方法 |
2.3.2 结果与分析 |
2.3.2.1 温度对OPH降解能力的影响 |
2.3.2.2 pH对OPH降解能力的影响 |
2.3.2.3 有机溶剂和盐离子对OPH降解能力的影响 |
2.3.2.4 毒死蜱、乐果和对硝基苯酚的标准曲线 |
2.3.2.5 OPH底物特异性分析 |
2.3.2.6 OPH酶促降解蝇毒磷动力学参数 |
2.3.2.7 OPH酶促降解毒死蜱动力学参数 |
2.3.2.8 OPH酶促降解对硫磷动力学参数 |
2.3.2.9 HPLC检测精密度和回收率 |
2.3.2.10 有机磷农残降解能力 |
2.3.2.11 成熟OPH的亚细胞定位 |
2.3.2.12 重组表达OPH的翻译后磷酸化修饰 |
2.3.3 讨论 |
第四节 转基因表达蛋白的潜在致敏性评价 |
2.4.1 材料与方法 |
2.4.1.1 转基因表达的蛋白序列 |
2.4.1.2 序列比对 |
2.4.1.3 蛋白质3D结构预测 |
2.4.1.4 抗原性预测 |
2.4.2 结果与分析 |
2.4.2.1 氨基酸序列完全比对分析 |
2.4.2.2 SDAP数据库完全序列比对 |
2.4.2.3 Farrp数据库完全序列比对 |
2.4.2.4 NCBI数据库完全序列比对 |
2.4.2.5 80个氨基酸框架滑行比对 |
2.4.2.6 6个氨基酸滑行比对 |
2.4.2.7 氨基酸匹配序列的空间结构特征 |
2.4.2.8 蛋白质的抗原性特征 |
2.4.3 讨论 |
第三章 乐果降解真菌的分离和鉴定 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 降解真菌的富集和分离 |
3.2.2 不同乐果浓度降解测试 |
3.2.3 不同碳源对乐果降解能力的影响 |
3.2.4 菌株F1的ITS序列克隆 |
3.2.5 菌株F1的ITS序列聚类分析 |
3.3 讨论 |
第四章 结论与展望 |
4.1 研究结论 |
4.2 研究创新 |
4.3 工作展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
(9)微生物对有机磷农药乐果在水—气界面挥发与降解的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 前言 |
1.1 研究的目的和意义 |
1.2 国内外研究现状 |
1.2.1 影响有机磷农药迁移的因素 |
1.2.2 有机磷农药的在环境中的挥发 |
1.2.3 有机磷农药的降解 |
1.2.4 有机磷农药的测定 |
1.3 研究的主要内容 |
第二章 试验材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 供试菌种 |
2.1.2 药品试剂 |
2.1.3 仪器设备 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 乐果的检测 |
2.2.2 乐果的水解试验 |
2.2.3 微生物对有机磷农药乐果的降解试验 |
2.2.4 有机磷农药乐果在水-气界面挥发试验 |
第三章 结果与分析 |
3.1 气相色谱绘制乐果标准曲线 |
3.2 乐果的水解试验研究 |
3.2.1 温度对乐果水解速率影响 |
3.2.2 pH 值对乐果水解速率影响 |
3.2.3 乐果的水解动力学分析 |
3.2.4 乐果的水解动力学方程 |
3.2.5 乐果的水解机理 |
3.3 微生物对乐果的降解性能 |
3.3.1 微生物的菌种形态 |
3.3.2 GB-1 菌种的鉴定 |
3.3.3 微生物生长曲线的绘制 |
3.3.4 微生物对乐果降解率的测定 |
3.3.5 微生物在不同温度条件下的生长及降解 |
3.3.6 微生物在不同pH 条件下的生长及降解 |
3.3.7 菌剂投放量不同时乐果的降解 |
3.4 乐果在水-气界面的挥发 |
3.4.1 初始浓度对乐果在水-气界面挥发的影响 |
3.4.2 温度对乐果在水-气界面挥发的影响 |
3.4.3 气流速度对乐果在水-气界面挥发的影响 |
3.4.4 乐果在水-气界面的挥发动力学 |
3.5 乐果在水-气界面的挥发与降解曲线 |
3.5.1 不同初始浓度的乐果在水-气界面的挥发降解 |
3.5.2 菌剂量对乐果在水-气界面的挥发与降解的影响 |
第四章 结论 |
参考文献 |
附录A 气相色谱标准工作曲线谱图 |
附录B 乐果的挥发动力学谱图 |
附录C 质谱检测谱图 |
附录D GB-1 菌株鉴定报告 |
攻读硕士学位期间发表论文 |
致谢 |
(10)有机磷农药乐果降解的研究现状与进展(论文提纲范文)
1 微生物降解 |
2 光催化降解 |
3 化学氧化降解 |
4 超声波降解 |
5 结语 |
四、菊苣假单胞菌对有机磷农药乐果的降解作用初报(论文参考文献)
- [1]果园农药对白三叶青贮品质及其微生物群落的影响[D]. 戈建珍. 西北农林科技大学, 2021
- [2]茶叶农残降解研究进展[J]. 陈艺文,陈成聪,庄明珠,金珊. 茶叶学报, 2020(01)
- [3]有机磷农药降解菌的筛选及菌剂的制备[D]. 张亚亚. 沈阳农业大学, 2019(02)
- [4]重组枯草芽孢杆菌分泌表达缺陷假单胞菌磷酸三酯酶及其发酵优化[J]. 杨贞妮,郭旋,钟近艺,辛瑜,李由然,石贵阳,张梁. 中国科学:生命科学, 2019(05)
- [5]浙江笋用竹林土壤农药污染特征及毒死蜱降解技术研究[D]. 汪娅黎. 浙江农林大学, 2016(05)
- [6]沼泽红假单胞菌PSB06抗植物病毒蛋白Rhp-PSP的基因克隆与原核表达[D]. 冯推紫. 湖南农业大学, 2015(02)
- [7]烟叶农残管控措施研究综述[A]. 彭云,欧阳进,鲁耀,刘智强. 云南省烟草学会2014年学术年会优秀论文集, 2015
- [8]有机磷水解酶基因OPD转化番茄、黄瓜降解农药残留的研究[D]. 赵杰宏. 贵州大学, 2009(12)
- [9]微生物对有机磷农药乐果在水—气界面挥发与降解的研究[D]. 黄雅. 北京工商大学, 2009(S2)
- [10]有机磷农药乐果降解的研究现状与进展[J]. 黄雅,李政一,赵博生. 环境科学与管理, 2009(04)