一、拉米夫定对慢性乙型肝炎患者可溶性HLA-1类分子含量的影响（论文文献综述）
张宝芳[1]（2019）在《贵州地区高风险乙型肝炎孕妇母婴垂直传播阻断的真实世界回顾性研究》文中提出乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染是一个影响全人类健康的主要公共卫生问题,乙型病毒肝炎是感染乙型肝炎病毒后引起的以肝功能损伤为主的全身性传染病,全球有20亿人血清学显示其曾感染过HBV,其中有3.5亿多人发展成为慢性HBV携带者,部分慢性乙型肝炎（Chronic Hepatitis B,CHB）患者会死于乙型肝炎所致的肝硬化和肝癌,给病人、家庭、社会带来了沉重的经济负担。目前,我国育龄期妇女HBsAg流行率约为6.6%,估算每年仍有100万名新生儿出生后面临感染HBV的高风险。2016年发布的《全球卫生部门病毒性肝炎战略》首次提出到2030年消除病毒性肝炎对公共卫生威胁的全球性目标,而“HBV母婴零传播”是实现该目标的重要一环,因此,中国肝炎防治基金会建立“乙肝母婴零传播工程项目”,贵州医科大学附属医院为全国第6家签订完成该项目单位。本课题将回顾性分析研究贵州高风险乙型肝炎孕妇（HBsAg、HBeAg双阳性,H3V DNA≥106 IU/ml,或第一胎已被感染HBV或孕妇本人就为乙肝母婴传播感染者）,分为孕期药物干预组及门诊非干预组与对照组（非乙型肝炎孕妇）及其出生的新生儿/婴幼儿,研究干预组孕期HBV病毒基因型及免疫功能变化与对抗病毒药物作用影响,其所生新生儿/婴幼儿在乙型肝炎疫苗及乙型肝炎免疫球蛋白联合标准规范免疫接种后,HBV母婴传播感染率及产生抗-HBs滴度。针对母婴传播患者,通过二代测序分析,判断母婴病毒全基因序列同源性及发现有宫内传播优势的特异突变位点。为HBV母婴传播感染发生机制及防控提供临床真实研究数据。所有研究人群均通过贵州医科大学附属医院伦理委员会审核同意通过。研究内容分为三部分报告。目的:1.观察孕期使用抗病毒药物阻断对贵州地区不同基因型高风险乙型肝炎孕妇HBVDNA 及 HBVRNA 的影响。2.对贵州地区高风险乙型肝炎孕妇母婴传播阻断后母婴结局观察。3.探索乙肝病毒宫内感染的无创性产前诊断。方法:第一部分,回顾性收集2016年05月-2018年05月在贵州医科大学附属医院感染科及产科门诊,入选患者诊断符合2015年修订的《慢性乙型肝炎防治指南》[2]的诊断标准,在孕12周前就诊查确诊慢性乙型肝炎CHB患者孕妇,均为HBsAg（Hepatitis B surface antigen,HB sAg）阳性持续超过6个月,并在孕24周前B超检查提示胎儿发育正常,血清丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus,HCV）、人类免疫缺陷病毒（Human immunodeficiency virus,HIV）、梅毒螺旋体抗体（Treponema pallidum antibody,RPR）标志物阴性,无先兆流产史。排除标准:①丈夫有HBV感染;②孕前半年内有使用干扰素治疗CHB患者;③孕期伴有其他类型的肝病,糖尿病,甲状腺疾病,高血压、慢性肾病,肿瘤,精神类等慢性疾病史;④肝硬化失代偿期患者;⑤产前B超提示胎儿发育异常或畸形。根据孕24周-28周是否抗病毒阻断分为两组:干预组（T）91例,未干预组（NT）259例,同期我院产科门诊体检健康非乙型肝炎孕妇（Health control,HC,定义为HBsAg阴性,肝功正常,既往无肝炎病史）作为对照组（C）100例。按照乙肝孕妇抗病毒指南,干预组均以阻断为目的,自愿在24-28周开始接受服用替诺福韦或者替比夫定抗病毒治疗直至分娩。开展人口统计学和临床特征调查并分别于孕12-24周,孕28-32周,孕36-40周采集血液样本,检测基因型,HBsAg、HBeAg、HBVDNA、HBVRNA,肝功能[丙氨酸转氨酶（ALT）天门冬氨酸氨基转移酶（AST）总胆红素（TBIL）总胆汁酸（TBA）胆碱酯酶（CHE）碱性磷酸酶（ALP）及对照组,未干预组,干预组在用药前（孕12-24W）及干预组分娩前（36-40周）检测T淋巴细胞（CD3+,CD4+CD8+）,NK 细胞（CD16+CD56）及 B 淋巴细胞（CD19）的变化。干预组均以阻断为目的,在孕24-28周开始口服富马酸替诺福韦二吡呋酯片（TDF）300 mg/d,购自葛兰素史克（天津）有限公司（国药准字H20153090）;或替比夫定（LDT）600 mg/d,购自北京诺华制药有限公司（国药准字H20070028）,抗病毒治疗直至分娩。数据采用连续变量以均数±标准差;分类变量以率进行统计分析。第二部分,研究人群为第一部分孕妇[非干预组（NT）259例,干预组（1）91例,对照组100例（C）)]及其所生婴幼儿（450例）,干预组及未干预组孕妇所生新生儿/婴幼儿均采取国家标准乙型肝炎计划免疫主被动联合接种（出生6 h内肌肉注射乙型肝炎免疫球蛋白100U,及0、1、6个月每次肌肉注射基因工程乙型肝炎疫苗10 μg）,对照组只注射乙型肝炎疫苗（0、1、6个月每次肌肉注射基因工程乙型肝炎疫苗10μg）。观察孕周及孕期不良反应,新生儿Apgar评分,及其幼儿7个月龄时定量检测血清乙型肝炎标志物（hepatitis B virus marker,HBVM）及 HBV DNA。HBV 母婴传播感染定义为乙型肝炎孕妇所生小孩出生后在7月龄后检测HBsAg阳性,或伴有HBV DNA阳性。数据统计:两两比较用LSD方法,组间比较,采用t检验,疗效分析采用协方差分析,组内比较采用符号秩和检验。第三部分,研究人群为第一部分孕妇（干预组91例及非干预组259例）及其所生婴幼儿（350例）,HBV孕妇于孕16-24周采血10ml进行二代测序,预测胎儿是否发生宫内感染（由贵州省产前诊断中心完成）,并已收集临床信息与血液样本。在充分考虑感染组与非感染组之间孕妇年龄和怀孕周数等特征分布平衡的基础上,从中挑选出一个包括128对母婴的样本测试集,其中经产后随访证实其中29例（均为第一部分未干预者）发生宫内感染,未发生宫内感染的母婴99对。通过孕妇血样中病毒DNA及胎儿游离DNA的提取和采取Illumina HiSeq 2000平台的测序分析,判断母婴病毒全基因序列同源性及发现有宫内传播优势的特异突变位点。统计学方法:组间比较,采用t检验,组内比较采用符号秩和检验。采用R软件3.2.3版本提供的“randomForest”工具包构建随机森林模型。结果:第一部分,对干预组91例e抗原阳性或和高载量病毒复制乙肝孕妇进行HBV基因分型:B型57例（57/91,62.63.18%）,C型34例（34/91,37.36%）,未发现其他基因类型。干预组用替诺福韦（TDF）和替比夫定（LDT）在人口统计学和临床特征方面没有差异,包括肝功能检查[TDF 治疗前:ALT21.30（9.01-362.49）,AST 25.19（13.62-345.53）,TBIL8.16（3.79-57.55）,ALP78.44（31.00-232.52）,TBA3.70（0.83-45.23）,治疗结束时:ALT 21.30（8.66-98.10）,AST 24.65（14.91-101.92）,TBIL 8.78（3.16-17.11）),ALP 148.05（53.98-470.61）,TBA 3.07（0.92-74.83）];LDT 组治疗前:ALT22.56（6.65-117.00）)AST23.02（16.37-62.00）,TBIL7.81（5.48-18.27）,ALP67.35（46.05-388.21）,TBA3.24（1.06-42.58）,治疗结束时:ALT 21.40（8.14-62.05）,AST 24.10（11.79-160.64）,TBIL 7.28（3.50-18.40）,ALP 162.40（47.30-423.96）,TBA 3.76（0.69-28.41）]。Log10（HBV DNA）和 Log10（HBV RNA）[TDF 组(治疗前:HBVDNA 4.84±2.01,HBVRNA6.35±1.10;治疗 4 周时:HBVDNA3.99±0.79,HBVRNA 6.05±0.94;治疗结束时:HBVDNA 3.06±0.66,HBVRNA 5.52±0.85;LDT 组（治疗前:HBVDNA5.08±1.99,HBVRNA6.47 ± 0.88;治疗 4 周时:HBVDNA4.45±1.18,HBVRNA6.51±0.82;治疗结束时:HBVDNA3.51±1.20,HBVRNA6.13±0.66）],与治疗前（孕12-24周）相比,替诺福韦与替比夫定在治疗结束时,Log10（HBVDNA）和Log10（HBV RNA）显着降低（P<0.05）。在排除其他变量的影响下,HBV基因型对HBVRNA载量有一定的影响,表现在C基因组的患者HBVRNA在治疗结束时比B基因组的患者少下降了 0.54个单位（logl0）,P值（0.01）<0.05。孕期CD3+及CD19细胞在各组中变化不大,而未干预组及干预组在用药前CD4+T细胞及CD8+T细胞较正常孕妇比较,其表达减低统计学有差异（P<0.05）,干预组用药后较用药前CD4+T细胞及CD8+T细胞表达增加,但CD4+T细胞增加更为明显,表达有统计学差异（F=9.38,P<0.01）,干预组用药后较正常对照组有差异,但无统计学意义,NK细胞（CD16+CD56）在未干预组及干预组用药前较对照组下降,有统计学差异（F=8.72 P=0.014）。第二部分HBV母婴结局观察到未干预组婴幼儿有乙型肝炎感染,表现为HBsAg 阳性（29/259,11.19%）,HBeAg 阳性（24/259,9.26%）及 HBV DNA 阳性（27/259,10.24%）。HBV母婴传播感染率为11.19%（29/259）,进一步分析非干预组婴幼儿HBV感染与母亲HBV DNA载量的关系,当母亲HBV DNA ≥ 106 IU/ml,其母婴传播感染高达38.67%（29/75）,本研究中母婴传播感染组其母亲HBV DNA均大于106 IU/ml,其中,HBeAg阳性15例,HBeAg阴性14例,针对二胎HBV孕妇（第一胎被感染HBV）中,未干预组有1例感染HBV。未干预原因主要由于孕妇就诊时间较晚,就诊时为孕38周,孕妇HBV DNA>106 IU/ml,HBeAg阳性。其余未干预组二胎孕妇病毒量均较低,其婴幼儿均未被感染。干预组其婴幼儿检测HBsAg,HBeAg及HBV DNA均阴性,HBV母婴传播感染率为零,HBV母婴阻断率为100%。而且有不同程度的乙型肝炎保护性抗体出现,其抗体滴度高于非干预组及对照组孕妇所生婴幼儿,差异有统计学意义（F=5.95,P<0.001）,与其孕妇既往感染HBV时间,孕周及分娩方式,新生儿出生Apgar评分,出生体重,喂养方式,性别等无统计学差别,但与孕期抗病毒治疗有明显的统计学差异。第三部分,针对29对发生HBV母婴垂直感染母婴患者,通过二代测序技术,成功从孕妇血标本提取胎儿游离DNA和乙肝病毒DNA及其测序,分析乙肝病毒全基因序列显示,各母子对病毒全基因序列同源性在99.4%至100%,19对母子（占比65.5%）病毒序列完全一致。按不同基因型分别与B2和C2野生型乙肝病毒株序列进行比较,母亲感染的B和C基因型突变株与野生株乙肝病毒均可通过宫内传播,未发现有宫内传播优势的特异突变位点。结论:1.贵州地区乙肝孕妇以B,C基因型为主,以阻断治疗为目的,在不同的基因型孕妇使用替诺福韦（TDF）或替比夫定（LDT）阻断治疗时,均能取得较好的疗效,但在持续抗病毒治疗基础上,B基因型病毒更容易得到控制。孕中晚期使用TDF或LDT治疗除可以控制HBV病毒外,未见明显不良反应,还可调节孕妇机体的T淋巴细胞免疫功能,其机制可能与改善CD4+T细胞亚群重建,继而引起CD8+T细胞增多有关。2.本课题非干预组发生了 HBV母婴传播,发生率为11.19%,母婴传播感染者其母亲分娩前HBV DNA均大于≥ 106 IU/ml,其中,HBeAg阳性15例,HBeAg阴性14例。进一步分析非干预组婴幼儿HBV感染与母亲HBV DNA载量的关系,当母亲HBV DNA≥106IU/ml其母婴传播感染高达38.67%（29/75）,提示高载量HBVDNA复制是发生乙型肝炎母婴传播的独立危险因素。3.二代测序技术用于监测HBV基因及其突变,产前无创性诊断HBV宫内传播,为设计精准的及个体化乙肝抗病毒抗病毒方案提供可靠的依据,可能是乙肝母婴传播的产前诊断重要评估技术。因此,针对乙型肝炎高风险孕妇,需产前HBV动态监测及药物干预与产后标准联合免疫阻断,才能从真正临床上实现乙型肝炎母婴零传播。
陶丽琳,赖欣,韦嘉[2]（2016）在《PD-1/PD-L信号通路在慢性HBV感染免疫反应中的作用》文中指出慢性乙型肝炎是影响我国人群健康的主要疾病之一,HBV的慢性感染可导致疾病的进展。程序性死亡因子（PD）1是近年来发现的属于B7/CD28家族的重要协同刺激分子,与其配体（PD-L）结合后在调节T淋巴细胞的活化、分化及增殖功能方面起着重要作用。在慢性HBV感染的不同阶段,PD-1及其配体的表达存在差异。PD-1及其配体在不同的免疫细胞上的相互作用引起机体的免疫耐受,最终导致HBV感染的慢性化。通过不同途径阻断PD-1/PD-L通路可以使耗竭的T淋巴细胞功能得到改善,提示可能是未来抗病毒治疗的方向之一。
黄金凤[3]（2016）在《补肾清毒法对慢性乙型肝炎患者外周血特异性CTL影响的实验研究》文中研究说明研究目的大量研究表明,中医药在治疗慢性乙型病毒性肝炎（Chronic Viral Hepatitis B,CHB）方面有着独特优势。补肾清毒法源于中医伏气理论“肾虚疫毒内伏肝血”。通过检测补肾清毒法治疗CHB患者前后外周血HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）的数量和功能,探讨补肾清毒法对CHB患者外周血特异性CTL的影响,部分阐明补肾清毒法抗HBV可能的作用靶点和免疫活化机制,探析慢性乙型肝炎肾虚邪伏理论的现代科学内涵,为补肾清毒法治疗慢性乙型肝炎提供较为全面的科学依据。研究方法1.收集广州中医药大学第一附属医院门诊随访的CHB患者,应用HLA-A2作为过筛指标,经流式细胞术直接荧光免疫法筛选HLA-A2阳性CHB患者共32例,所有入选的HLA-A2阳性CHB患者随机分为西药组15例和中西药组17例。另设10例HLA-A2阳性健康献血者为正常对照组。西药组予拉米夫定治疗,中西药组在拉米夫定治疗基础上加用补肾清毒法。2.采集正常组、中西药组、西药组入组时和治疗6个月后外周静脉血20ml,用密度梯度离心法分离得到外周血单个核细胞（PBMC）,并冻存于液氮中。3.细胞复苏培养后,采用MHC I-五聚体（Pentamer）染色流式检测技术直接检测HBcAg18-27表位特异性CTL的细胞数量。4.细胞复苏培养后,采用MHC I-五聚体（Pentamer）结合胞内细胞因子（ICS）染色流式检测技术,检测HBcAg18-27表位特异性CTL细胞毒效应分子穿孔素（Perforin）、颗粒酶B （Granzyme B）和细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）的表达。5.细胞复苏培养后,采用酶联免疫吸附斑点试验（Enzyme Linked Immunologic Spot Assay, ELISPOT）技术测定经HBcAg18-27I肽段诱导特异性CTL分泌IFN-γ的应答频率和平均反应强度。研究结果1.补肾清毒法对外周血HBcAg18-27表位特异性CTL细胞数量的影响治疗前,中西药组和西药组特异性CTL细胞的频率（Pentamer+细胞数占CD3+CD8+双阳性细胞总数比例）较正常组高（P<0.05）；与治疗前相比,中西药组和西药组治疗后特异性CTL细胞的频率明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）；和西药组相比,中西药组特异性CTL细胞的频率明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）。2.补肾清毒法对外周血HBcAg18-27表位特异性CTL细胞功能的影响（1） Pentamer结合ICS染色流式检测细胞毒效应分子Perfori、Granzyme B和细胞因子IFN-γ的表达Perforin:治疗前,中西药组和西药组特异性CTL细胞Perforin表达频率（Pentamer+Perforin+细胞数占CD3+CD8+细胞总数的比例）较正常组高（P<0.05）,但两治疗组总体频率偏低；与治疗前相比,中西药组和西药组治疗后特异性CTL细胞Perforin表达的频率上升,差异有统计学意义（P<0.05）,但总体表达频率仍偏低;‘治疗后,西药组和中西药组特异性CTL细胞Perforin的表达频率相近,差异无统计学意义。Granzyme B:治疗前,中西药组、西药组和正常组特异性CTL细胞Granzyme B表达频率（Pentamer+Granzyme B+细胞数占CD3+CD8+细胞总数的比例）均偏低；与治疗前相比,中西药组和西药组治疗后特异性CTL细胞Granzyme B表达的频率上升,差异有统计学意义（P<0.05）,但总体表达频率仍偏低；治疗后,西药组和中西药组特异性CTL细胞Granzyme B的表达频率相近,差异无统计学意义。IFN-γ:治疗前,中西药组和西药组特异性CTL细胞IFN-γ的表达频率（Pentamer+IFN-γ+细胞数占CD3+CD8+细胞总数的比例）较正常组高（P<0.05）；与治疗前相比,中西药组和西药组治疗后特异性CTL细胞IFN-γ的表达频率明显上升,差异有统计学意义（P<0.05）；和西药组相比,中西药组特异性CTL细胞IFN-γ的表达频率较高,差异有统计学意义（P<0.05）。（2） ELISPOT法测定经HBcAg18-27I肽诱导特异性CTL分泌IFN-γ的应答频率和平均反应强度治疗前,中西药组和西药组特异性CTL细胞对HBcAg18-27I表位肽的应答频率和平均反应强度较低,两组间差异比较无统计学意义（P>0.05）；与治疗前相比,中西药组和西药组治疗后特异性CTL细胞对HBcAg18-27I表位肽的的应答频率和平均反应强度有所上升,但差异均无统计学意义（P>0.05）；和西药组相比,中西药组特异性CTL细胞对HBcAg18-27I表位肽的的应答频率和平均反应强度均较高,但差异无统计学意义（P>0.05）。研究结论1.治疗前,中西药组和西药组CHB患者特异性CTL细胞的数量和表达细胞因子水平偏低,我们认为,这与CHB患者特异性CTL免疫功能障碍有关。正常健康人群特异性CTL水平也较低,这可能由于健康人循环血中不存在HBV特异性抗原的持续刺激,导致HBV特异性CTL水平偏低。2.补肾清毒法治疗后CHB患者外周血特异性CTL细胞数量明显上升。Perforin、 Granzyme B虽有上升,但总体表达频率仍偏低,而IFN-γ则总体表达频率升高明显,表明HBV特异性CTL的非胞毒途径可能在清除病毒中发挥更重要作用。补肾清毒法通过增加特异性CTL细胞数量和改善活化CTL分泌IFN-γ的能力使特异性T细胞免疫功能增强。3. Perforn、Granzyme B、IFN-γ在Pentamer-CD3+CD8+细胞群中表达水平也较高,我们认为,补肾清毒法对非特异性CTL或非HBcAg18-27表位的特异性CTL也有一定程度的影响。补肾清毒法可能通过多靶点、多环节影响免疫系统中多种免疫细胞及细胞因子,发挥免疫调节作用。
严景妍[4]（2015）在《黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究》文中进行了进一步梳理目的:通过体内外实验研究黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染的作用和机理。方法:1.黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染雏鸭体内实验研究。筛选感染鸭乙型肝炎病毒的一日龄,重约50克/只的雄性龙岩麻鸭48只,随机分为病毒对照组,恩替卡韦治疗组（0.1mg/kg）,黄芪注射液高、中、低剂量（20ml/kg、10ml/kg、5ml/kg）联合恩替卡韦治疗组及单用黄芪注射液高剂量治疗组（20ml/kg）6个实验组,每组8只动物。于治疗前（T0）,治疗7天（T7）,治疗14天（T14）,治疗21天（T21）,停药5天（P5）,停药10天（P10）,停药20天（P20）测定病毒含量并进行比较。2.黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染Hep G2.2.15细胞体外实验研究。培养Hep G2.2.15细胞,将细胞分为病毒对照组,恩替卡韦治疗组（30nmol/L）,黄芪注射液高、中、低剂量联合恩替卡韦治疗组和黄芪注射液高、中、低剂量治疗组（1000ng/ml、500ng/ml和250ng/ml）共8个实验组,每组设9个复孔,用CCK8比色法检测用药组细胞的增殖情况。分别于用药第3天（T3）,停药第3天（P3）,用PCR荧光探针方法检测各组细胞上清和细胞内HBVDNA。3.黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究之Hep G2和Hep G2.2.15细胞体外实验研究。培养Hep G2细胞和Hep G2.2.15细胞。将未转染乙肝病毒的Hep G2细胞作为空白对照组细胞,转染了乙肝病毒的Hep G2.2.15细胞作为用药组和病毒对照组细胞,将细胞分为空白组,恩替卡韦治疗组（30nmol/L）,黄芪注射液高、中、低剂量联合恩替卡韦治疗组和黄芪注射液高、中、低剂量治疗组（1000ng/ml、500ng/ml和250ng/ml）,病毒对照组共9个实验组,每组设6个复孔。用药培养3天,将其中每组3个复孔细胞消化、裂解等处理后,应用荧光定量PCR方法检测药物对Hep G2.2.15细胞JAK-STAT通路信号m RNA的影响,另3个复孔细胞消化、裂解等处理后,用蛋白免疫印迹（Western Blotting）方法检测药物对细胞内NF-κB、OAS、PKR、Caspase3蛋白的影响。4.黄芪注射液联合恩替卡韦对刀豆蛋白ConA造成的NIH小鼠免疫性肝损伤实验研究。购买72只雄性NIH小鼠,随机分为正常对照组,恩替卡韦治疗组（45μg/kg）,黄芪注射液高、中、低剂量联合恩替卡韦治疗组,黄芪注射液高、中、低剂量治疗组（1.5、1、0.5ml/10g）,模型对照组,9个实验组,每组8只动物。除正常对照组外,其余小鼠尾静脉注射Con A20mg/kg后,分别于首日上、下午和次日下午各灌胃给药一次,末次给药后4h,模型组和各给药组小鼠一次性静脉注射Con A20mg/kg,禁食、不禁水,8h后摘小鼠眼球取血,离心分离血浆。测血浆中ALT、IFN-γ、TNF-α、SOD、MDA、NO,统计给药前和给药之后的变化。测各组小鼠的肝脏、脾脏、胸腺系数均值并进行对比,取肝左叶组织,10%甲醛溶液固定,电镜下观察病理切片组织结构的改变。随机取每组3只小鼠除肝左叶以外的剩余肝脏100mg,研磨、裂解等处理后应用蛋白免疫印迹（Western Blotting）方法观察各组肝细胞内NF-κB、OAS、PKR、Caspase3蛋白的变化。结果:1.黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染雏鸭体内实验研究。本次实验病毒对照组动物血清DHBV-DNA水平稳定;黄芪注射液联合恩替卡韦三个剂量组及恩替卡韦组在治疗7天后鸭血清DHBV-DNA均出现明显下降趋势,与相同时间的病毒对照组相比较具有显着性差异（P<0.01）;黄芪注射液联合恩替卡韦组三个剂量组病毒载量的回升出现在停药20天以后,在停药5天、10天后并没有出现病毒的明显反跳,与相同时间的病毒对照组和给药前相比较具有显着性差异（P<0.01）,说明黄芪注射液联合恩替卡韦组三个剂量组都可以延缓DHBV-DNA反弹,其中黄芪注射液中剂量联合恩替卡韦组最为明显;而恩替卡韦组则在停药5天后病毒就出现明显的反弹;单独用黄芪注射液高剂量组在治疗21天后鸭血清DHBV-DNA均未出现明显下降趋势,与相同时间的病毒对照组相比较没有显着性差异（P>0.05）,这说明黄芪注射液本身抗病毒作用微弱。2.黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染Hep G2.2.15细胞体外实验研究。根据预实验结果,确定恩替卡韦作用浓度为30nmol/L,黄芪注射液作用高、中、低三个浓度为1000ng/ml、500ng/ml、250ng/ml。用药3天,恩替卡韦可以抑制细胞内、外HBVDNA分泌,与病毒对照组比较有差别（细胞内P<0.01、细胞外P<0.05）。停药3天,细胞内、外HBVDNA定量反弹,和病毒对照组比较无差别（P>0.05）。用药3天,黄芪注射液各剂量组对细胞内、外HBVDNA无抑制作用,与病毒对照组比较无差别（P>0.05）。用药3天,高、中剂量的黄芪注射液联合恩替卡韦可以抑制细胞内、外的HBVDNA的分泌,与病毒对照组比较有差别（细胞内P<0.01、细胞外P<0.05）。停药3天,HBVDNA的反弹明显（P<0.05）,除高剂量黄芪注射液联合恩替卡韦细胞外HBVDNA定量小于病毒对照组（P<0.05）。余用药组细胞内、外HBVDNA与病毒对照组无显着差别（P>0.05）。这说明高剂量的黄芪注射液联合恩替卡韦有停药后延缓细胞外HBVDNA反弹的效果。3.黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究之HepG2和Hep G2.2.15细胞体外实验研究。较之空白组细胞,病毒对照组JAK-STAT通路的ISGF3m RNA的表达下降（P<0.05）,余m RNA变化不明显（P>0.05）。较之病毒对照组,恩替卡韦组可使STAT2 m RNA表达增强（P<0.05）,余用药组无影响（P>0.05）;恩替卡韦组和黄芪注射液中、低剂量联合恩替卡韦组可使ISGF3m RNA表达增强（P<0.05）;各组用药对STAT1、OAS、PKR三个m RNA均没有影响（P>0.05）。病毒的感染使得细胞JAK-STAT通路的m RNA表达受到了影响,主要表现在ISGF3基因表达的减弱,而黄芪注射液中、低剂量联合恩替卡韦组可以使其表达恢复正常（较之空白对照组P>0.05）,恩替卡韦虽然也可以增强其表达,但是效果弱于联合用药组（较之空白对照组P<0.05）。黄芪注射液联合恩替卡韦对HepG2.2.15细胞炎性反应蛋白的影响。较之空白对照组,病毒对照组各蛋白表达除Caspase3差异无统计学意义（P>0.05）,其余蛋白的表达均上升明显（P<0.01）。较之病毒对照组,黄芪注射液低剂量联合恩替卡韦组NF-κB下降（P<0.05）;恩替卡韦组、黄芪注射液中剂量联合恩替卡韦组、黄芪注射液中、低剂量组OAS均下降（P<0.05或P<0.01）;黄芪注射液低剂量联合恩替卡韦组、黄芪注射液高剂量组PKR下降（P<0.05）;余用药组对NF-кB、OAS、PKR无影响（P>0.05）,各用药组对Caspase3无影响（P>0.05）。4.黄芪注射液联合恩替卡韦治疗刀豆蛋白（Con A）造成的NIH小鼠免疫性肝损伤实验研究。较之正常对照组,模型组ALT升高了。较之模型组,黄芪注射液小剂量组以外各用药组均能明显降低小鼠ALT（P<0.05）。较之恩替卡韦组,黄芪注射液高剂量联合恩替卡韦组和恩替卡韦对ALT的降低作用相当（P>0.05）,余有效用药组效果更差（P<0.01）。较之正常对照组,模型组SOD、MDA、NO均上升（P<0.01）。较之模型组,各组均能降SOD（P<0.01）;除黄芪注射液小剂量组以外,各组均能降MDA（P<0.01）;各组均能降NO（P<0.05或P<0.01）。较之恩替卡韦组,各组降SOD作用小于恩替卡韦（P<0.05或P<0.01）;各组降MDA作用黄芪注射液高剂量联合恩替卡韦组作用和恩替卡韦组相当（P>0.05）,余用药组效果小于恩替卡韦（P<0.01）;各组降NO作用黄芪注射液高剂量联合恩替卡韦组和恩替卡韦组效果相当（P>0.05）,余用药组效果小于恩替卡韦组（P<0.05或P<0.01）。较之正常对照组,模型组TNF-α和INF-γ均明显升高（P<0.01）,较之模型组,恩替卡韦组（P<0.01）,及高、中剂量黄芪注射液联合恩替卡韦组肝组织中的TNF-α显着降低了（P<0.05或P<0.01）,其余各组对TNF-α没有显着影响（P>0.05）。较之恩替卡韦组,黄芪注射液高、中剂量联合恩替卡韦组降TNF-α效果与恩替卡韦组相当（P>0.05）;各治疗组均对INF-γ有显着降低作用（P<0.01）,黄芪注射液高剂量联合恩替卡韦组效果和恩替卡韦组相当（P>0.05）,余用药组效果比恩替卡韦组更差（P<0.05或P<0.01）。较之正常对照组,模型对照组NF-кB、OAS、PKR、Caspase3均升高（P<0.01）;较之模型对照组,恩替卡韦组NF-кB升高（P<0.05）,余用药组无作用（P>0.05）;除黄芪注射液低剂量组和黄芪注射液中剂量联合恩替卡韦组对OAS无影响（P>0.05）,余用药组均降低了OAS（P<0.05或P<0.01）;黄芪注射液中、低剂量联合恩替卡韦组PKR升高（P<0.05或P<0.01）,黄芪注射液高剂量联合恩替卡韦组、黄芪注射液高剂量组PKR降低（P<0.05）,余用药组PKR无变化（P>0.05）;各用药组均对Caspase3无影响（P>0.05）。肝脏系数,较之正常组,模型组肝脏系数明显增高（P<0.01）;较之模型组,恩替卡韦组和黄芪注射液低剂量组较之模型组有明显的增高（P<0.01）,黄芪注射液中剂量组和黄芪注射液低剂量联合恩替卡韦组没有变化（P>0.05）,黄芪注射液高、中剂量联合恩替卡韦组、黄芪注射液高剂量组有显着的降低作用（P<0.01）;较之正常组,经黄芪注射液高剂量联合恩替卡韦组治疗后肝脏系数几乎没有变化（P>0.05）。脾脏系数,较之正常组,模型组脾脏系数明显增高（P<0.01）;较之模型组,恩替卡韦和黄芪注射液低剂量组有明显的增高（P<0.01）,黄芪注射液中剂量组和黄芪注射液低剂量联合恩替卡韦组没有变化（P>0.05）,黄芪注射液高、中剂量联合恩替卡韦组和黄芪注射液高剂量组有显着的降低作用（P<0.01或P<0.05）。胸腺系数,较之正常组,模型组胸腺系数明显降低（P<0.01）;较之模型组,恩替卡韦和黄芪注射液低剂量组有明显的降低（P<0.01）,黄芪注射液中剂量组没有变化（P>0.05）,联合用药组和黄芪注射液高剂量组可以明显升高胸腺系（P<0.01）。肝脏病理切片,各用药组和正常组相比较,存在着组织的病理损伤（P<0.01）,各用药组和模型组相比,病理损伤减轻（P<0.01）。结论:黄芪注射液联合恩替卡韦具有很好的抗乙型肝炎病毒感染的作用,其疗效优势在于不仅可以很好的抑制乙型肝炎病毒的复制,而且可以在停药后延缓乙型肝炎病毒的反弹。有关的作用机理包括调节JAK-STAT通路m RNA表达和免疫应答所产生的抗病毒细胞因子和蛋白。黄芪注射液联合恩替卡韦对免疫性肝损伤有较好的降谷丙转氨酶、炎性反因子、炎性反应蛋白及保护肝细胞作用,总体来说,其抗病毒、护肝、调节免疫反应的综合疗效较之单独使用这两种药物要好。黄芪注射液联合使用或单独使用,抗病毒和免疫调节的疗效均呈剂量依赖性,实验证实,高、中剂量的黄芪注射液使用抗病毒总体效果较好,低剂量的黄芪注射液免疫激发作用更加突出。本实验提示临床使用黄芪注射液根据慢性乙型肝炎患者的病情需要灵活掌握使用浓度可控制药效不同的发挥方向。两药物联合使用可能比单独使用恩替卡韦或黄芪注射液更加安全有效,其作用还有待临床试验的验证。
都芳鹃[5]（2013）在《胆系疾病与乙型肝炎病毒感染相关性研究》文中提出目的乙型病毒性肝炎（简称乙肝）系由乙型肝炎病毒（hepatitis virus B,HBV）所引起的一种肝脏疾病，主要经输血、注射和母婴传播。HBV属于独特的嗜肝DNA病毒，是已知真核细胞中最小的DNA病毒，结构紧凑，功能齐全。乙肝常导致慢性感染，有15%～40%未经抗病毒治疗的患者将进展为终末期肝病，如肝硬化、肝衰竭及肝癌等。乙型肝炎病毒感染亦是一种全身性传染性疾病，胆囊与肝脏紧邻，肝脏分泌的胆汁在胆囊内贮存，胆囊有可能成为HBV侵犯的靶器官。胆系疾病以胆囊炎、胆石症多见，本课题以胆囊炎、胆石症做为主要研究对象；探讨胆系疾病与乙肝病毒感染的关系。方法随机抽取符合《外科学》（第7版）诊断标准的胆囊炎胆石症患者60例为胆系疾病组，均化验肝功能等指标，检测该组HBsAg的阳性率；另随机抽取我院2012年至2013年收住的非肝胆疾病患者60例作为对照组，收录标准：均行肝胆超声检查并化验肝功能、血凝等指标正常，检测该组HBsAg的阳性率，与胆系疾病组做比较。结果（1）胆系疾病组乙肝病毒感染率为70.0%，对照组乙肝病毒感染率达13.3%。（2）胆系疾病患者中乙肝的发生与ALT、BIL呈正相关，与A/G呈负相关。（3）胆系疾病合并乙肝患者男性多于女性。结论胆囊炎、胆石病的发生与乙肝病毒感染有明显的相关关系。
陈莉[6]（2012）在《慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞中微小RNA的表达分析及其功能研究》文中指出研究背景：乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染所致的慢加急性肝衰竭（HBV-related acute-on-chronic liver failure, ACLF）是临床常见的危重症,病死率较高,对人类危害严重。关于ACLF的发病机制,目前认为主要包括病毒复制和宿主免疫反应及其相互作用两个方面,但是HBV无直接致细胞病变效应,其本身并不直接对感染细胞产生破坏效应,由此人们认为ACLF发病机制的主要环节为病毒在一定条件下所诱发的宿主免疫应答异常。微小RNA（microRNA, miRNA）是近年来新发现的一类非编码小分子RNA。miRNA表达丰富,作用广泛,胚胎发育、细胞增殖分化均受miRNA的调控,同时miRNA也参与机体免疫反应的调节。miRNA可以通过Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）与细胞因子信号途径对机体固有免疫进行调控,也可通过干扰抗原呈递及T细胞受体（T cell receptors, TCRs）途径对机体适应性免疫进行调控。作为机体免疫应答的始动者,miRNA在HBV感染发病机制中的作用也日益得到重视。多项研究已经证实,多个miRNA参与控制HBV复制、HBV相关肝脏疾病的进展,尤其是肝硬化和肝细胞癌的进展；也有研究发现对于接受干扰素（interferon,IFN）治疗的慢性HBV或丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV）感染者,可利用患者外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cells, PBMC）中miRNA表达水平的变化来协助判断疾病的临床转归。然而关于miRNA与ACLF的关系,目前知之甚少。研究目的：（1）了解肝脏炎症程度不同的慢性HBV感染者PBMC中miRNA的表达谱。（2）确认慢性HBV感染者PBMC中是否存在与肝脏炎症程度相关的特异性miRNA。（3）对特异性miRNA可能的靶基因进行预测,了解慢性HBV感染者PBMC中特异性miRNA靶基因的表达水平。（4）对miR-197、miR-328的靶基因进行确认,初步探讨慢性HBV感染者体内]miR-197、miR-328的作用途径。研究方法：（1）应用miRNA基因芯片技术对HBV相关的4例无症状携带者（asymptomatic carrier, ASC）及4例ACLF患者PBMC中miRNA的表达谱进行检测,对差异性表达的miRNA进行筛选。（2）采用TargetScan5.2,DIANA-microT3.0及Pictar生物软件对miR-197、 miR-328的靶基因进行预测。（3）采用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction, real-time PCR）对HBV相关的70例ASC,107例慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B, CHB）患者,76例ACLF患者,及51例健康对照者PBMC中miR-150、miR-197、 miR-223、miR-328、miR-30a、miR-574-3p的表达水平进行验证分析；同时对PBMC中miR-197的靶基因白细胞介素18（interleukin18,IL18）、肿瘤坏死因子配体超家族10（tumor necrosis factor ligand superfamily member10, TNFSF10）, miR-328的靶基因肿瘤坏死因子受体超家族9（tumor necrosis factor receptor superfamily member9, TNFRSF9）的mRNA表达水平进行检测。（4）采用基因瞬时转染的方法,分别将miR-197mimic和inhibitor; miR-328mimic和inhibitor转染至单核细胞系THP-1细胞中,采用CCK-8法检测各转染组及对照组细胞增殖率；酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测各转染组及对照组细胞培养上清中IL18表达水平;应用real-time PCR检测各转染组及对照组miR-328, miR-197与TNFRSF9、TNFSF10、IL18的mRNA表达水平；western blot检测各转染组及对照组TNFRSF9、TNFSF10的蛋白表达水平。研究结果：（1）miRNA基因芯片检测显示慢性HBV感染所致的ASC与ACLF患者PBMC中共有17个miRNAs出现差异性表达,与ASC患者相比较,肝脏炎症活动明显的ACLF患者PBMC中hsa-miR-1246、hsa-miR-30a、hsa-miR-1305、hsa-miR-193a-3p和hsa-miR-196b共5个miRNAs表达上调,同时hsa-miR-223、 hsa-miR-574-3p、hsa-miR-150等12个miRNAs表达下调。（2）对肝脏炎症程度不同的慢性HBV感染者PBMC中miRNA的表达水平扩大样本进行验证分析发现,miR-197、miR-574-3p及miR-30a的PCR验证分析结果与miRNA基因芯片分析结果一致,而miR-150、miR-223与miR-328的PCR验证分析结果与miRNA基因芯片分析结果存在一定的差异。验证分析显示随着慢性HBV感染者肝脏炎症程度的逐渐加重,miR-197的表达水平逐渐下调,而miR-328的表达水平逐渐上调。同时,正常对照组PBMC中miR-574-3p、miR-30a的表达水平较慢性HBV感染者明显升高;而与正常对照组相比较,ACLF患者PBMC中miR-150表达上调；但是各组间miR-223的表达水平无明显差异。（3）TargetScan5.2等靶基因预测软件分析发现,miR-197可与TNFRSF9、TNFSF10、IL18的3’非编码区（untranslated region,UTR）互补配对,miR-328可与TNFRSF9的3’UTR互补配对。肝脏炎症程度不同的慢性HBV感染者PBMC中,TNFRSF9的表达水平随肝脏炎症程度的加重而降低,与1miR-328的表达水平趋势相反；TNFSF10、IL18的表达水平随肝脏炎症程度的加重而增加,与miR-197的表达水平趋势相反。（4）与空白转染组及mimic control （miR-C）转染组,inhibitor control （anti-miR-C）转染组相比较,miR-197mimic转染组中IL18、TNFRSF9、TNFSF10的mRNA及蛋白表达水平均降低,有显着性差异；miR-197inhibitor转染组中IL18的mRNA及蛋白表达水平均增加,有显着性差异；虽然miR-197inhibitor转染组中TNFRSF9的mRNA表达水平明显增加,但是其蛋白表达水平并没有显着增加；同时,miR-197inhibitor转染组中TNFSF10的1mRNA表达水平明显增加,但是其蛋白表达水平并没有显着增加；与空白转染组及miR-C转染组,anti-miR-C转染组相比较,miR-328mimic转染组中TNFRSF9的mRNA及蛋白表达水平均降低,有显着性差异；miR-328inhibitor转染组中TNFRSF9的mRNA及蛋白表达水平均增加,有显着性差异。结论：（1）miRNA基因芯片检测技术的重复性欠佳,miRNA表达谱的确定需结合real-time PCR检测技术综合分析。（2）慢性HBV感染者PBMC中存在与肝脏炎症程度相关的特异性miRNA,这些miRNA（尤其是1miR-197,miR-328）参与HBV的发病,可能是慢性HBV相关肝脏炎症程度的潜在生物学标志之一。（3）慢性HBV感染者PBMC中IL18、TNFRSF9、TNFSF10的表达水平与肝脏炎症程度存在一定的联系。（4）miR-197可对IL18的mRNA及蛋白表达水平产生负性调节作用：miR-328可对TNFRSF9的mRNA及蛋白表达水平产生负性调节作用。（5）]miR-197可对TNFRSF9的mRNA表达水平产生负性调节作用。（6）1miR-197可对TNFSF10的mRNA表达水平产生负性调节作用。（7）可能miR-197通过下调IL18的表达,miR-328通过下调TNFRSF9的表达参与慢性HBV感染后的发病。
张随涛[7]（2012）在《疏肝健脾解毒法对慢性乙型病毒性肝炎（肝郁脾虚挟湿热证）IFN-γ影响的临床研究》文中认为目的：通过疏肝健脾解毒法治疗慢性乙型病毒性肝炎（肝郁脾虚挟湿热型）患者的临床观察,研究其对患者血清IFN-γ水平的影响,探讨疏肝健脾解毒法对慢性乙型病毒性肝炎的作用机理。方法：选取2010年1月至2011年5月黑龙江中医药大学附属第一医院肝脾胃病科门诊的慢性乙型病毒性肝炎患者。严格按照纳入标准纳入病例60例,将随机其分为对照组和治疗组,每组30例患者,另设正常对照组30例。治疗组服用疏肝健脾解毒方治疗。对照组给予乙肝清热解毒胶囊治疗。疗程为3个月。治疗前后观察患者体内IFN-γ的变化、临床综合疗效、主要中医证候改善情况、肝功能及其HBV-DNA的变化。应用SPSS17.0统计软件进行数据统计分析,计数料用X2检验,计量资料用t检验,等级资料采用Ridit分析。结果：1.治疗组总有效率为93.33%,对照组总有效率为66.66%,两组临床综合疗效比较有统计学差异（P<0.05）2.治疗组患者的症状体征有明显改善（P<0.01）,但与对照组比较无差异（P>0.05）。3.治疗组能够明显改善患者的肝功（P<0.01）,与对照组比较（P>0.05）,无显着性差异4.慢性乙型病毒性肝炎患者血清IFN-γ水平低于正常人组（P<0.01）。5.治疗组可以降低HBV-DNA的定量（P<0.01）,与对照组比较有显着差异（P<0.05）。6.治疗组能明显提高患者血清IFN-γ水平（P<0.01）,与对照组比较有差异（P<0.05）。7.患者HBV-DNA的载量与血清IFN-γ水平高呈负相关（P<0.05）,有统计学意义。结论：疏肝健脾解毒法对慢性乙型病毒性肝炎（肝郁脾虚挟湿热）患者,具有改善证侯、恢复肝功,抗病毒等作用。尤其此法能够提高慢性乙型病毒性肝炎患者血清IFN-γ水平,所以疏肝健脾解毒法很大可能通过调动免疫因子水平,改善体内免疫状态来提高治疗的疗效。
陈炎[8]（2012）在《补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态患者的临床观察》文中进行了进一步梳理目的：1.通过对比慢性乙型病毒性肝炎（Chronic Hepatitis B,CHB）无焦虑状态患者和CHB伴焦虑状态患者的临床疗效,评价焦虑状态对CHB患者的影响；2.通过观察补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态患者的临床疗效,从而探讨补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态具有的优势。方法：对广州中医药大学第一附属医院肝炎及脑病科2011年3月至2011年9月符合纳入标准的门诊患者共69例进行前瞻性研究。将纳入的CHB患者以汉密尔顿焦虑量表评分,分为无焦虑状态的A组和伴焦虑状态的B组；继而将B组患者随机分为B1（补肾清毒组）、B2（补肾清毒疏肝组）、B3（帕罗西汀组）三组。基础治疗：中药为补肾清毒方,西药为拉米夫定。其中,A组和B1组以基础中药和西药治疗,B2组以基础中药和西药加用疏肝解郁药物（柴胡、百合、郁金）,B3组以基础西药加用帕罗西汀。以上四组均连续治疗24周,做以下三部分临床观察：①比较A组和B1组各组治疗前后及两组治疗后中医证候积分、血清HBV-DNA.ALT. HBeAg的变化；②比较B1、B2组各组治疗前后及两组治疗后中医证候积分、汉密尔顿焦虑量表评分、血清HBV-DNA. ALT. HBeAg的变化；③比较B2、B3组各组治疗前后及两组治疗后中医证候积分、汉密尔顿焦虑量表评分、血清HBV-DNA. ALT. HBeAg的变化。结果：临床观察一：经过24周治疗,①无焦虑状态和伴焦虑状态两组CHB患者的中医证侯积分,血清HBV-DNA定量和ALT显着下降（P<0.01）；②无焦虑状态患者中医证侯积分较伴焦虑状态患者低,但两组间无统计学差异（P>0.05）；③无焦虑状态患者ALT下降较伴焦虑状态患者明显（P<0.05）；④无焦虑状态患者HBV-DNA定量较伴焦虑状态患者低（P>0.05）,而HBeAg/抗-HBe血清转换率较伴焦虑状态患者高（P<0.05）。临床观察二：治疗24周后,①补肾清毒组和补肾清毒疏肝组两组患者中医证候积分、汉密尔顿焦虑量表评分、血清HBV-DNA定量、ALT均显着下降（P<0.01）；②补肾清毒疏肝组患者中医证候积分及汉密尔顿量表评分均较补肾清毒组患者低（P<0.05）；③补肾清毒疏肝组患者HBV-DNA定量及ALT较补肾清毒组患者低（P<0.05）,而HBeAg/抗-HBe血清转换率较补肾清毒组患者高（P<0.05）临床观察三：治疗24周后,①补肾清毒疏肝组和帕罗西汀两组患者中医证候积分、汉密尔顿焦虑量表评分、血清HBV-DNA定量、ALT数值均显并下降（P<0.01）；②补肾清毒疏肝组患者中医证候积分较帕罗西汀组患者低（P<0.05）；③帕罗西汀组患者汉密尔顿焦虑量表评分较补肾清毒疏肝组患者低（P>0.05）；④补肾清毒疏肝组患者HBV-DNA定量较帕罗西汀组患者低（P<0.05）,ALT也较帕罗西汀组患者低（P>0.05）,而HBeAg/抗-HBe血清转换率较帕罗西汀组患者高（P>0.05）。结论：1.焦虑状态阻碍慢性乙肝患者ALT复常及HBeAg/抗-HBe血清转换；2.补肾清毒疏肝法和补肾清毒法对CHB患者临床症状均有明显改善作用,但对于伴焦虑状态的CHB患者,补肾清毒疏肝法临床疗效更好,不仅可以缓解焦虑症状,还可降低HBV-DNA定量,使肝功复常,促使HBeAg/抗-HBe转换；3.补肾清毒疏肝法在改善中医证候方面疗效优于帕罗西汀,但帕罗西汀抗焦虑作用强于补肾清毒疏肝法；4.补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态患者的临床疗效良好,尤其在改善中医证候方面颇具优势,并能有效缓解焦虑症状、降低HBV-DNA定量,促进ALT复常、HBeAg/抗-HBe血清转换,安全性高。
辛桂杰[9]（2012）在《替诺福韦酯治疗对慢性乙型肝炎疗效及治疗过程中宿主的免疫应答研究》文中研究指明乙型肝炎病毒（HBV）感染是严重威胁我国人民健康的重大传染病，并且是慢性肝炎、肝硬化、肝癌的主要原因。慢性乙型肝炎治疗较困难，目前尚无任何药物治疗可以达到痊愈。关于慢性乙型肝炎的治疗，抗病毒治疗是关键。目前有两种主要途径治疗CHB，一种通过刺激免疫的方法，如干扰素（IFN），另一种是通过抑制HBV复制的方法，口服抗病毒药物：核苷（酸）类似物。干扰素能有效抑制HBV复制从而通过刺激免疫系统诱导肝脏疾病缓解。但有限的疗效、流感样不良反应及相对严格的适应症、禁忌症限制了其临床应用。核苷（酸）类似物具有耐受性、安全性良好和服用方便等特点，已广泛应用于临床抗HBV治疗。但其缺点是长期服药容易出现病毒耐药，耐药变异后的病毒反弹会抵消前期的临床受益，因而针对上述情况，寻求更强效抑制病毒复制、低耐药及长期应用安全的药物是目前药物研发研究的热点。一种新的核苷（酸）类似物抗病毒药物-替诺福韦酯（tenofovir disoproxil fumarate，TDF）的出现给患者带来了新的希望，到今天为止，未见有TDF的HBV临床耐药报告。TDF在我国尚未被批准上市，现正处于临床试验研究中。慢性HBV感染及其治疗过程中宿主因素起到重要作用，炎性细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和IL-17A均在此过程中发挥了重要的作用。近些年随着基因组学研究的进步，研究发现宿主的单核苷酸基因多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）在HBV感染及清除中也起重要作用。但相关HBV感染的免疫学研究尚不明确。本研究收集吉林大学第一医院门诊及入院CHB患者，签署知情同意书后进行筛选试验，选取24例核苷和核苷（酸）类似物初治CHB患者，包括HBeAg阳性或阴性的病例（HBV DNA≥105拷贝/毫升，间隔14天以上的两次检测ALT升高HBeAg阳性患者≥2ULN（正常值上限）；HBeAg阴性患者>1ULN且≤10ULN），采用随机、双盲、双模拟、活性药对照研究，按1:1随机分入替诺福韦酯300mg/d治疗组或阿德福韦酯10mg/d治疗组，并于治疗基线、治疗后4周、8周、12周、24周后进行肝功能、乙肝病毒标志物、HBV DNA定量检测；比较治疗后生化学及病毒学的应答情况及细胞因子的动态变化情况，分析其相关性；同时测定24例患者的IL-10的SNPs（rs1800896、rs1800871、rs1800872）并分析与抗病毒治疗的情况和细胞因子的动态变化情况的相关性。本研究使用三色法流式细胞仪采用微阵列流式细胞术（CBA）方法和焦磷酸测序等技术做了以下工作：（1）针对替诺福韦酯治疗的慢性乙型肝炎患者，观察其治疗4周、8周、12周、24周后生化学及病毒学的应答情况并与阿德福韦酯治疗的情况相比较。（2）针对替诺福韦酯治疗的慢性乙型肝炎患者，动态观察其治疗4周、8周、12周、24周后血清中细胞因子的浓度，包括细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和IL-17A，分析其变化规律；同时与阿德福韦酯治疗的情况相比较。（3）针对替诺福韦酯、阿德福韦酯抗HBV治疗慢性乙型肝炎患者进行人类IL-10SNPs（rs1800896、rs1800871、rs1800872）位点检测，分析其与抗病毒疗效及细胞因子的变化的相关性。本实验结果如下：（1）慢性乙型肝炎患者经替诺福韦酯治疗后，ALT、AST及HBV DNA较基线时呈下降趋势，治疗4周、8周、12周、24周后，HBV DNA水平与基线相比，均明显下降（P<0.05），且治疗4周与8周之间，8周与12周之间，12周与24周之间均存在显着性差异（p<0.05）；与阿德福韦酯治疗未见明显差异。替诺福韦酯治疗的7例HBeAg阳性患者在治疗24周后，有3例出现HBeAg血清学转换；阿德福韦酯治疗的8例HBeAg阳性患者未出现HBeAg血清学转换。（2）慢性乙型肝炎患者经替诺福韦酯治疗后，血清IL-10水平在治疗12周、24周后时较基线时下降且存在显着性差异，具有统计学意义（p<0.05）。血清IL-10水平与HBV DNA定量下降水平成负相关（p <0.05）。血清IL-17A水平在治疗24周后，较基线相比明显下降（p <0.05）。血清IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6水平治疗4周、8周、12周、24周后其变化不明显，无统计学意义（p＞0.05）。阿德福韦酯治疗组血清IL-10水平的变化情况与替诺福韦酯治疗组相似，其余六种细胞因子未见明显变化。（3）替诺福韦酯、阿德福韦酯的抗病毒疗效及血清IL-10、IL-17A水平与IL-10SNPs（rs1800896、rs1800871、rs1800872）位点的相关性分析，未见有统计学意义（p＞0.05）。通过慢性乙型肝炎患者替诺福韦酯抗病毒治疗过程中细胞因子的变化结果，表明替诺福韦酯可能通过免疫调节起到抑制病毒的作用。病毒学应答分析后，提示血清细胞因子IL-10的水平与HBV DNA具有一定的相关性，故考虑血清细胞因子IL-10水平与替诺福韦酯抗病毒治疗后病毒复制情况密切相关。血清细胞因子IL-10、IL-17A水平在抗病毒早期可以作为慢性乙型肝炎患者治疗过程中的一项临床监测指标，提示疾病预后及转归。本文通过对慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗过程中Th1/Th2/Th17细胞分泌的细胞因子的动态监测，阐明在慢性乙型肝炎抗病毒治疗中血清中Th1/Th2/Th17细胞因子水平的变化，对于明确慢性乙型肝炎的发病机制及指导临床治疗有重要意义。
李泽禹[10]（2011）在《补气解毒法治疗慢性乙型肝炎的临床观察与实验研究》文中研究表明1补气解毒法治疗慢性乙型肝炎患者40例的临床疗效分析1.1目的在中医理论指导下,结合张朝曦教授多年的临床实践经验,参考目前研究成果,选用张朝曦副教授多年治疗慢性乙型肝炎的经验总结补气解毒法基本方,通过临床随机对照试验研究,明确补气解毒法治疗慢性乙型肝炎方面的疗效。1.2方法研究采用临床随机对照前瞻性研究,收集2009年10月至2011年4月在广州中医药大学第一附属医药门诊就诊符合慢性乙肝肝炎诊断的患者80例,随机分为中药治疗组和茵栀黄颗粒对照组各40例。中药治疗组给予补气解毒法基本方,随证加减,每天一剂,3个月为一个疗程。茵栀黄颗粒对照组给予茵栀黄颗粒冲服,每天三次,每次6g,3个月为一个疗程。观察两组治疗前后的症状体征积分变化、肝功能改善、病原学改变等情况,作出综合判断。1.3结果经过3个月的治疗观察,中药治疗组的总有效率92.5%,茵栀黄颗粒对照组总有效率72.5%。两组经过统计学分析,有显着差异。中药治疗组优于茵栀黄颗粒对照组。中药治疗组在改善疲倦、活动后加重、食少纳差、神疲懒言、肝脾肿大优于茵栀黄颗粒对照组,具有统计学差异。中药治疗组在可明显降HBV-DNA定量,转阴3例,但不具有统计学差异。补气解毒法可提高A/G比例,病原学提示中药治疗组2例HBeAg转阴,说明补气解毒法可调高人体免疫功能,帮助产生抗体。1.4结论补气解毒法具有明显改善慢性乙型肝炎患者的症状体征,护肝降酶。降低胆红素及抑制病毒作用,有一定的免疫调节作用；同时,补气解毒法基本方在临床应用安全,有效。2补气解毒法对HBV转基因小鼠的淋巴细胞亚群及肝脏病理实验研究2.1目的观察补气解毒法基本方对HBV转基因小鼠T淋巴细胞亚群及肝脏病理的影响。2.2方法采用补气解毒法基本方水提液通过灌胃治疗HBV转基因小鼠,与灌胃生理盐水的模型组对照,分别于眼眶后静脉丛采血五次,于最后一次采血后,处死小鼠,解剖,取肝脏组织,观察其对T淋巴细胞亚群变化及肝脏病理的影响。2.3结果补气解毒法基本方可以平稳降低淋巴细胞亚群,与治疗前比较有差异,有统计学意义。但是,与模型组比较,无统计学意义。补气解毒法基本方可以显着改善肝脏的形态学,减轻肝细胞损伤,减少炎症细胞的浸润。2.4结论补气解毒法可以通过调节免疫,使免疫紊乱状态趋于平稳,减轻肝脏病理性损伤,改善肝脏形态学。
二、拉米夫定对慢性乙型肝炎患者可溶性HLA-1类分子含量的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、拉米夫定对慢性乙型肝炎患者可溶性HLA-1类分子含量的影响（论文提纲范文）
（1）贵州地区高风险乙型肝炎孕妇母婴垂直传播阻断的真实世界回顾性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 替诺福韦及替比夫定对贵州地区高风险乙肝孕妇孕期HBV病毒及免疫功能影响 |
| 前言 |
| 1. 对象与方法 |
| 1.1 研究人群 |
| 1.2 治疗方案 |
| 1.3 资料收集 |
| 1.4 检测方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1 孕妇基本资料 |
| 2.2 干预组用TDF或LDT前肝功能及乙肝标志物及HBVDNA及HBVRNA,基因型对比 |
| 2.3 自孕24-28周用替诺福韦或者替比夫定抗病毒治疗效果判断 |
| 2.4 不同基因型的HBVDNA在不同治疗时间点的变化趋势 |
| 2.5 不同基因型的HBVRNA在不同治疗时间点的变化趋势 |
| 2.6 孕期免疫功能变化 |
| 3. 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 对贵州地区高风险乙型肝炎孕妇母婴传播的临床结局观察 |
| 前言 |
| 1 对象及方法 |
| 1.1 研究人群 |
| 1.2 阻断措施 |
| 1.3 资料收集 |
| 1.4 诊断标准 |
| 1.5 检测方法 |
| 1.6 统计学方法 |
| 结果 |
| 2.1 分娩前干预组及非干预组HBV孕妇基本资料产后新生儿情况 |
| 2.2 未干预组与干预组所分娩的婴幼儿HBV母婴传播感染比较 |
| 2.3 未干预组与干预组,对照组所分娩的婴幼儿畸形率及产生乙肝保护性抗体(HBsAb)比较 |
| 3 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 探索乙肝病毒宫内感染的无创性产前诊断 |
| 前言 |
| 1. 对象及方法 |
| 1.1 研究人群 |
| 1.2 检测方法 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1 胎儿游离DNA和乙肝病毒DNA的提取 |
| 2.2 胎儿游离DNA和乙肝病毒DNA测序 |
| 2.3 乙肝母婴传播产前预测模型 |
| 2.4 母婴垂直传播的HBV基因型及基因序列测定及其同源性判断 |
| 3. 讨论 |
| 小结 |
| 总结及展望 |
| 1. 本研究取得的成果 |
| 2. 本研究的创新之处 |
| 3. 本研究存在的不足 |
| 4. 展望 |
| 参考文献 |
| 综述乙肝病毒基因型及宿主基因多态性 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论着、论文 |
| 博士在读期间主持课题 |
| 博士在读期间所获科研奖励 |
| 英文缩略语 |
| 致谢 |
（2）PD-1/PD-L信号通路在慢性HBV感染免疫反应中的作用（论文提纲范文）
| 1 PD-1及其配体的基本特性 |
| 2 PD-1及其配体在慢性HBV感染中的免疫调节作用 |
| 2.1 PD-1与CD4+辅助性T淋巴细胞(Th)细胞在慢性HBV感染中的作用 |
| 2.2 PD-1与CD8+CTL在慢性HBV感染中的作用 |
| 2.3 PD-1与CD4+CD25+Treg在慢性HBV感染中的作用 |
| 2.4 PD-1及其配体与DC在慢性HBV感染中的作用 |
| 3 PD-1及其配体在CHB患者不同阶段的表达 |
| 4 抗病毒治疗对PD-1及其配体表达的影响 |
| 5 PD-1信号通路与CHB患者抗病毒治疗的关系 |
| 6 结语 |
（3）补肾清毒法对慢性乙型肝炎患者外周血特异性CTL影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 HBV特异性CTL免疫应答 |
| 一、HBV特异性CTL的作用机制 |
| 二、不同类型HBV感染者的特异性CTL应答 |
| 三、HBV特异性CTL介导的非损伤性清除病毒 |
| 四、HBV特异性CTL检测方法研究进展 |
| 第二节 中医药对慢性乙型肝炎的认识 |
| 一、病因病机、辨证分型 |
| 二、中医药抗病毒的研究进展 |
| 三、伏气温病与慢性乙型肝炎的关系 |
| 四、补肾清毒法的确立 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 HBV外周血特异性CTL细胞数量的检测 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 第二节 HBV外周血特异性CTL细胞功能的检测 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 第三节 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（4）黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 乙型肝炎病毒及其感染 |
| 一、乙型肝炎病毒分类 |
| 二、乙型肝炎病毒形态结构与理化特征 |
| 三、乙肝病毒血症的自然史 |
| 四、慢性乙型肝炎患者的机体免疫功能缺陷和免疫病理过程 |
| 第二节 慢性乙型肝炎的治疗 |
| 一、慢性乙型肝炎的护肝治疗 |
| 二、慢性乙型肝炎的抗病毒治疗 |
| 三、慢性乙型肝炎的免疫调节治疗 |
| 四、慢性乙型肝炎的中医药治疗 |
| 第三节 慢性乙型肝炎体内外实验模型 |
| 一、鸭乙型肝炎动物模型 |
| 二、免疫性肝损伤动物模型 |
| 三、乙肝病毒感染细胞模型 |
| 第二章 实验技术路线图 |
| 第一节 黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究总路线图 |
| 第二节 黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染鸭动物模型体内实验路线图 |
| 第三节 黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙肝病毒感染HepG2.2.15细胞体外实验路线图 |
| 第四节 黄芪注射液联合恩替卡韦治疗NIH小鼠ConA免疫性肝损伤实验路线图 |
| 第三章 实验研究 |
| 第一节 黄芪注射液联合恩替卡韦抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第二节 黄芪注射液联合恩替卡韦对HepG2.2.15细胞HBVDNA的抑制作用 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第三节 黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究之一药物对HepG2和HepG2.2.15细胞JAK-STAT通路mRNA的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第四节 黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究之二药物对HepG2.2.15细胞NF-ΚB、OAS、PKR、Caspase3四个蛋白表达的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 第五节 黄芪注射液联合恩替卡韦治疗ConA致NIH小鼠免疫性肝损伤的实验研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（5）胆系疾病与乙型肝炎病毒感染相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（6）慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞中微小RNA的表达分析及其功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 第一章 慢性乙型肝炎病毒感染者PBMC中miRNA表达的芯片筛选 |
| 引言 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 第二章 慢性乙型肝炎病毒感染者PBMC中miRNA表达的确认分析 |
| 引言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 miR-197靶向调控IL18,miR-328靶向调控TNFRSF9参与慢性HBV感染后的发病 |
| 引言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述一 微小RNA与肝脏疾病关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 重型乙型肝炎发病机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 |
（7）疏肝健脾解毒法对慢性乙型病毒性肝炎（肝郁脾虚挟湿热证）IFN-γ影响的临床研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 中医文献综述 |
| 1.1 病名探讨 |
| 1.2 病位探讨 |
| 1.3 病因病机 |
| 1.4 中医辨证分型研究现状 |
| 1.5 慢性乙型病毒性肝炎中医辨证论治研究进展 |
| 1.6 慢性乙型病毒性肝炎的中医中药治疗 |
| 2 西医综述 |
| 2.1 慢性乙型病毒性肝炎的流行病学情况 |
| 2.2 慢性乙型病毒性肝炎发病机制的认识 |
| 2.3 慢性乙型病毒性肝炎治疗研究概况 |
| 2.4 关于γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ) |
| 临床研究 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 症状分级量化积分 |
| 1.4 纳入标准 |
| 1.5 排除标准 |
| 1.6 治疗方法 |
| 1.7 观测指标 |
| 1.8 疗效判定标准 |
| 1.9 数据处理及统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 可比性分析 |
| 2.3 综合疗效比较 |
| 2.4 治疗前后中医症状积分变化 |
| 2.5 治疗前后肝功能指标的比较 |
| 2.6 慢性乙型病毒性肝炎患者与正常人血清IFN-γ水平的比较 |
| 2.7 治疗前后血清IFN-γ及HBV-DNA载量的关系 |
| 3 讨论 |
| 3.1 疏肝健脾解毒方的立方依据 |
| 3.2 组方原理 |
| 3.3 现代药理研究 |
| 3.4 慢性乙型病毒性肝炎患者存在Th1/Th2细胞失衡的免疫功能紊乱 |
| 3.5 中医中药对慢性乙型病毒性肝炎患者血清IFN-γ的影响 |
| 3.6 问题与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
（8）补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态患者的临床观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1. 中医对于慢性乙肝及焦虑症的认识 |
| 1.1 慢性乙肝中医相关内容 |
| 1.2 中医对于焦虑症的认识 |
| 2. 现代医学对于慢性乙肝及焦虑症的研究 |
| 2.1 慢性乙肝西医研究 |
| 2.2 焦虑症的西医研究 |
| 2.3 慢性乙肝与焦虑症的关系 |
| 第二章 补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态患者的临床研究 |
| 1. 研究方案 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 脱落病例标准 |
| 1.6 研究方法 |
| 1.7 观察指标 |
| 1.8 统计处理 |
| 2. 研究内容 |
| 1.1 临床观察一 无焦虑状态CHB患者与伴焦虑状态CHB患者治疗对比 |
| 2.2 临床观察二 补肾清毒法与补肾清毒疏肝法治疗对比 |
| 2.3 临床观察三 补肾清毒疏肝法与帕罗西汀治疗对比 |
| 第三章 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（9）替诺福韦酯治疗对慢性乙型肝炎疗效及治疗过程中宿主的免疫应答研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 抗病毒治疗对 HBV 慢性感染治疗进展及对免疫系统影响 |
| 1.1.1 核苷（酸）类似物对慢性乙型肝炎治疗进展 |
| 1.2 SNPS 与 HBV 感染 |
| 1.2.1 SNP 的概念及检测方法 |
| 1.2.2 SNPs 与 HBV 感染 |
| 第2章 实验研究 |
| 2.1 材料及方法 |
| 2.1.1 资料和仪器 |
| 2.1.2 主要试剂及溶液 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 研究对象人口学及临床特征 |
| 2.2.2 替诺福韦酯、阿德福韦酯治疗后生化学、病毒学及血清学应答 |
| 2.2.3 替诺福韦酯、阿德福韦酯治疗期间 Th1/Th2/Th17 型细胞因子水平的动态变化 |
| 2.2.4 IL-10SNPs 的检测结果及替诺福韦酯治疗 CHB 疗效相关性分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 替诺福韦酯治疗慢性乙型肝炎的疗效 |
| 2.3.2 CHB 患者替诺福韦酯治疗前后 Th1/Th2/Th17 细胞分泌的细胞因子表达水平与 HBV DNA 相关性分析 |
| 2.3.3 展望 |
| 2.4 结论 |
| 本研究的创新点和意义 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（10）补气解毒法治疗慢性乙型肝炎的临床观察与实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 西医对慢性乙型肝炎的认识 |
| 1.1.1 慢性乙型肝炎的流行病学 |
| 1.1.2 乙型肝炎病毒 |
| 1.1.3 乙型肝炎的基因差异 |
| 1.1.4 乙型肝炎病毒的传播 |
| 1.1.5 乙型肝炎病毒的复制 |
| 1.1.6 乙型肝炎的致病机制 |
| 1.1.7 细胞因子与乙型肝炎的关系 |
| 1.1.8 西医抗病毒治疗药物 |
| 1.2 中医对肝炎的认识 |
| 1.2.1 古代文献论述 |
| 1.2.2 乙型肝炎病因病机 |
| 1.2.3 慢性乙型肝炎辨证与方药 |
| 1.2.4 乙型肝炎的中医辨证论治 |
| 1.3 中西医结合治疗 |
| 1.4 前景与展望 |
| 第2章 临床研究 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究对象 |
| 2.2.1 病例来源 |
| 2.2.2 诊断标准 |
| 2.2.4 纳入标准 |
| 2.2.5 排除标准 |
| 2.2.6 退出标准 |
| 2.3 研究方案 |
| 2.3.1 病例分组 |
| 2.3.2 治疗方法 |
| 2.3.3 观察指标 |
| 2.3.4 疗效标准 |
| 2.4 疗效判定标准 |
| 2.5 数据统计 |
| 2.6 临床结果分析 |
| 2.6.1 综合疗效分析 |
| 2.6.2 治疗前后临床体征积分及症状变化分析 |
| 2.6.3 治疗前后肝功能改善方面情况 |
| 2.6.4 治疗前后HBV-DNA定量变化情况 |
| 2.6.5 治疗前后病原学改变情况 |
| 2.6.6 安全性分析 |
| 2.7 临床讨论 |
| 2.7.1 气虚邪伏是慢性乙型肝炎的病机本质之一 |
| 2.7.2 肝郁毒蕴是慢性乙型肝炎的病理表现之一 |
| 2.7.3 补气解毒,疏肝活血为基本治法之一 |
| 2.7.4 补气解毒法方药分析 |
| 2.7.5 茵栀黄颗粒护肝降酶观察 |
| 2.7.6 补气解毒法的临床疗效分析 |
| 第3章 实验研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.1.3 血液分析 |
| 3.1.4 肝脏组织病理学观察 |
| 3.2 统计学处理 |
| 3.3 结果统计 |
| 3.3.1 补气解毒法对HBV转基因小鼠的淋巴细胞亚群的影响 |
| 3.3.2 结果分析 |
| 3.3.3 补气解毒法对HBV转基因小鼠肝脏病理形态学的影响 |
| 3.4 实验讨论 |
| 3.4.1 HBV实验研究模型 |
| 3.4.2 病毒感染的免疫机制 |
| 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
四、拉米夫定对慢性乙型肝炎患者可溶性HLA-1类分子含量的影响（论文参考文献）
- [1]贵州地区高风险乙型肝炎孕妇母婴垂直传播阻断的真实世界回顾性研究[D]. 张宝芳. 苏州大学, 2019(04)
- [2]PD-1/PD-L信号通路在慢性HBV感染免疫反应中的作用[J]. 陶丽琳,赖欣,韦嘉. 临床肝胆病杂志, 2016(12)
- [3]补肾清毒法对慢性乙型肝炎患者外周血特异性CTL影响的实验研究[D]. 黄金凤. 广州中医药大学, 2016(02)
- [4]黄芪注射液联合恩替卡韦抗乙型肝炎病毒感染机理研究[D]. 严景妍. 广州中医药大学, 2015(02)
- [5]胆系疾病与乙型肝炎病毒感染相关性研究[D]. 都芳鹃. 泰山医学院, 2013(01)
- [6]慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞中微小RNA的表达分析及其功能研究[D]. 陈莉. 中南大学, 2012(03)
- [7]疏肝健脾解毒法对慢性乙型病毒性肝炎（肝郁脾虚挟湿热证）IFN-γ影响的临床研究[D]. 张随涛. 黑龙江中医药大学, 2012(01)
- [8]补肾清毒疏肝法治疗CHB伴焦虑状态患者的临床观察[D]. 陈炎. 广州中医药大学, 2012(10)
- [9]替诺福韦酯治疗对慢性乙型肝炎疗效及治疗过程中宿主的免疫应答研究[D]. 辛桂杰. 吉林大学, 2012(12)
- [10]补气解毒法治疗慢性乙型肝炎的临床观察与实验研究[D]. 李泽禹. 广州中医药大学, 2011(11)